金釵石斛多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗白內(nèi)障活性研究.pdf

1、金釵石斛(Dendrobium nobile Lindl.)為蘭科(Orchidaceae),石斛屬(Dendrobium Sw.)多年生附生草本植物,是中國藥典(2010版)收載的名貴中藥。金釵石斛化學(xué)成分的研究主要為生物堿、萜類、木脂素、酚類等小分子化合物,對其多糖類組分的研究較少。為了了解金釵石斛多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)及生物活性,本文對金釵石斛多糖進(jìn)行了提取、分離純化、結(jié)構(gòu)表征、糖鏈構(gòu)象和抗白內(nèi)障活性的研究。
　　 金釵石斛干燥的

2、莖脫色脫脂后經(jīng)熱水浸提獲得金釵石斛水提粗多糖DNP-W,DNP-W進(jìn)一步用DEAE-纖維素和葡聚糖凝膠進(jìn)行分離純化,獲得7個均一多糖組分DNP-W1A、DN-P-W1B、DNP-W2、DNP-W3、DNP-W4、DNP-W5和DNP-W6。采用化學(xué)(甲基化分析、高碘酸氧化-Smith降解反應(yīng)、部分酸水解)與波譜學(xué)(UV、IR、GC、GC-MS、ESI-MS、NMR)結(jié)合的手段,對各均一多糖的一級結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。結(jié)果表明DNP—W1A是由

3、Man、Glc和Gal組成的半乳葡甘聚糖,主鏈由α-(1→6)-linked Manp和α-(1→3]Minked Manp組成,Glep和Oalp殘基支鏈分別通過α-(1→6)-linked Manp的3位和2位連接在主鏈上。DNP-W1B是一個阿拉伯半乳葡聚糖,擁有[→4)-β-Glcp-(1→6)-β-Glcp-(1→]二糖單位的主鏈結(jié)構(gòu),在β-(1→6)-linked Glep的4位形成分支,支鏈由Galp和Arap殘基組成。D

4、NP-W2是一個部分乙?；陌肴楦事镀暇厶?主鏈由β-(1→4)-linked Glep、β-(1→6)-linked Glep及β-(1→4)-linkedManp組成,其中部分β-(1→4)-linked Glep及β-(1→4)-linked Manp的6位連接有末端Galp。DNP-W3為阿拉伯半乳聚糖,主鏈由β-(1→3)-linked Galp組成,在其4位連接Arap和Rhap殘基支鏈。DNP-W4是一個主鏈由β-(1→4

5、)-Glep、β-(1→6)-linked Glep及β-(1→6)-linked Galp組成的酸性雜多糖。DNP—W5和DNP-W6為果膠類多糖,由[→4)-α-GalAp-(1→2)-α·Rhap-(1→]二糖重復(fù)單位構(gòu)成主鏈,DNP-W5主鏈GalAp的3位和鼠李糖的4位存在分支,側(cè)鏈包括半乳糖區(qū)域和葡萄甘露糖區(qū)域和木糖鏈。DNP-W6主鏈Rhap的4位存在分支,支鏈區(qū)包括半乳糖區(qū)域和葡萄甘露糖區(qū)域。
　　 抗白內(nèi)障活性

6、試驗表明,金釵石斛水提粗多糖及各均一多糖組分都對鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的糖尿病性白內(nèi)障有一定的延緩作用,但各多糖處理組之間差異較大,以粗多糖與DNP-W1A處理組的效果最好,呈劑量依賴性。實驗結(jié)束時,粗多糖與DNP-W1A處理組大鼠晶體混濁程度明顯低于模型及其它多糖處理組,體重增加幅度在150-190％之間,血糖下降了25％以上,晶體各清除氧自由基酶活性及GSH含量顯著高于STZ模型組,膜脂過氧化指標(biāo)MDA與H2O2、蛋白質(zhì)氧化損傷產(chǎn)

7、物、糖基化終產(chǎn)物等含量顯著低于STZ模型組。結(jié)合金釵石斛多糖抗白內(nèi)障活性試驗的生化指標(biāo)測定及各均一多糖的結(jié)構(gòu)分析,金釵石斛多糖抗白內(nèi)障活性與其減輕大鼠晶體氧化損傷及抑制糖基化終產(chǎn)物的形成有關(guān),其活性作用的化學(xué)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)可能與多糖中甘露糖含量及其連接方式有關(guān)。
　　 進(jìn)一步采用掃描電鏡(SEM)、X-射線、差示掃描量熱儀(DSC)、尺寸排除色譜-激光光散射(SEC-LLS)和原子力顯微鏡(AFM)等方法對抗白內(nèi)障活性多糖DNP-W1