機(jī)械通氣致兔急性肺損傷后肺內(nèi)VCAM-1和VEGF時(shí)序性表達(dá)的研究.pdf

1、目的:研究大潮氣量機(jī)械通氣致兔急性肺損傷(ALI)后肺組織在炎癥發(fā)生發(fā)展及愈合修復(fù)過程中血管細(xì)胞粘附因子(VCAM-1)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的動態(tài)表達(dá)變化及其與損傷時(shí)間的關(guān)系。
　　方法:(1)以兔存活率、肺水腫及病理組織改變程度為衡量標(biāo)準(zhǔn),建立大潮氣量機(jī)械通氣致兔急性肺損傷的動物模型。(2)按兔急性肺損傷模型分別在急性肺損傷后不同時(shí)間點(diǎn)肺標(biāo)本取材,實(shí)驗(yàn)方法包括:右上肺組織濕干重比(W/D)比較不同時(shí)間點(diǎn)肺水腫情況;常規(guī)

2、HE染色反映肺損傷后肺組織病理形態(tài)學(xué)改變;免疫組織化學(xué)染色(SABC法)檢測VCAM-1及VEGF的表達(dá)變化;免疫蛋白印跡(western blotting)檢測VCAM-1和VEGF表達(dá)情況。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組B(VT60ml/kg)與實(shí)驗(yàn)組A(VT45ml/kg)比較,肺組織病理改變和炎癥反應(yīng)明顯,肺水腫程度嚴(yán)重;與實(shí)驗(yàn)組C(VT68ml/kg)比較,雖然病理改變和肺水腫程度差異小,但具有兔存活率高(91.67％)的特點(diǎn)。因此

3、,選擇試驗(yàn)組 B作為大潮氣量機(jī)械通氣致急性肺損傷動物模型標(biāo)準(zhǔn),符合下一步研究的實(shí)驗(yàn)需要。
　　在大潮氣量機(jī)械通氣致急性肺損傷動物模型的基礎(chǔ)上,檢測實(shí)驗(yàn)組( VT60ml/kg)肺損傷后12~24h肺水腫程度及病理改變最嚴(yán)重;VCAM-1在急性肺損傷后3h開始在肺泡上皮細(xì)胞和肺血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)表達(dá),3~12h內(nèi)逐步上升,并在12h達(dá)到高峰,之后隨時(shí)間延長逐漸下降,約在24h后未見表達(dá);VEGF在急性肺損傷后12h在肺泡上皮細(xì)胞和肺血管

4、內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)表達(dá)開始增加,在此后的36h內(nèi)呈不斷上升的趨勢。
　　對圖像分析數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,分別曲線擬合VCAM-1在ALI后0~48h內(nèi)及VEGF在ALI后6~48h內(nèi)的數(shù)學(xué)回歸方程式推斷損傷時(shí)間。
　　結(jié)論:(1)成功建立大潮氣量機(jī)械通氣致急性肺損傷動物模型,建立指標(biāo)為 VT60ml/kg、R50次/分、Fi0221%。
　　(2)VCAM-1參與了在大潮氣量機(jī)械通氣致急性肺損傷后肺組織炎癥發(fā)生發(fā)展過程;而 VE