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1、目的:獲取完整的人MGP基因的cDNA克隆,并在大腸桿菌Top10中表達(dá)蛋白MGP.方法:利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)從正常人肺組織總RNA中擴(kuò)增出人MGP基因編碼區(qū)cDNA序列,將其克隆至pGEM-Teasy載體中,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌JM109.進(jìn)行序列測(cè)定確定其為完整的編碼序列.用酶切的方法將MGP的cDNA從pGEM-Teasy載體切下后與表達(dá)載體pTrcHis B連接,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌Top10,測(cè)序無(wú)堿基缺失及突變后,用I
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