特發(fā)性矮小兒童血清生長(zhǎng)激素受體的測(cè)定及臨床意義.pdf

1、目的:1973年Tsushima等首先在兔肝細(xì)胞膜上發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)激素受體(growth hormone receptor,GHR),GHR的氨基酸序列在80年代被確定,它是一個(gè)由620個(gè)氨基酸組成的跨膜糖蛋白,分子量為130kDa,是一單通道受體,具有三個(gè)獨(dú)特的區(qū)域,即與配體結(jié)合的細(xì)胞外區(qū)、跨膜多肽區(qū)和對(duì)受體激活產(chǎn)生應(yīng)答或稱(chēng)“第二信使”的細(xì)胞內(nèi)區(qū)。GHR的細(xì)胞膜外區(qū),亦稱(chēng)生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白(Growth Hormone Binding Pro

2、tein,GHBP):其缺陷會(huì)導(dǎo)致外周GH轉(zhuǎn)運(yùn)及與靶細(xì)胞結(jié)合障礙;GHR跨膜區(qū):膜轉(zhuǎn)運(yùn)缺陷可致GH錨定障礙,而GHBP可正常;GHR膜內(nèi)區(qū):該區(qū)缺陷可引起GH與受體內(nèi)的兩面神激酶(Janus Kinase,JAK)/信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子(Signaltransducers and activators of transcription,STAT)結(jié)合障礙。人類(lèi)生長(zhǎng)軸是個(gè)多因素、多環(huán)節(jié)的過(guò)程,國(guó)內(nèi)外大量研究已證實(shí),在組織和細(xì)胞水平,生長(zhǎng)

3、激素(growth hormone,GH)發(fā)揮作用的第一步是與靶細(xì)胞膜表面的GHR結(jié)合,由GHR介導(dǎo),通過(guò)不同的途徑將信號(hào)轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi),從而產(chǎn)生一系列的生理效應(yīng)。那么GH發(fā)揮作用與之結(jié)合的首要因素GHR異常的話(huà),之后的一系列反應(yīng)將無(wú)法進(jìn)行,必然會(huì)導(dǎo)致不同類(lèi)型及不同程度的生長(zhǎng)障礙。GHR異?？梢鸢↙aron綜合癥、特納氏綜合癥等在內(nèi)的多種生長(zhǎng)障礙,且如糖尿病、腎衰竭、腹壁多脂癥等多種疾病中均有GHR的參與。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)GHR異常有可能

4、也是造成特發(fā)性矮小(IdiopathicShort Stature,ISS)的一個(gè)重要病因[1]。本研究將通過(guò)測(cè)定ISS兒童血清中的GHR水平、觀察其濃度的變化進(jìn)一步探討GHR在ISS發(fā)病機(jī)制中的作用,為臨床上個(gè)體化治療提供理論依據(jù)。
　　 方法:1對(duì)象與分組:以1995-2004年中國(guó)九市城、郊區(qū)兒童體格發(fā)育調(diào)查資料參考值作為評(píng)價(jià)兒童生長(zhǎng)發(fā)育的參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。選擇2008年6月-2009年5月于河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院兒科矮小門(mén)診就診并

5、診斷為特發(fā)性矮小[2]兒童30例作為實(shí)驗(yàn)組,年齡為3.7-16.5歲(平均年齡10.5歲),其中男童20例,女童10例;同時(shí)隨機(jī)抽取來(lái)院正常查體兒童30例作為健康對(duì)照組,年齡為4-16歲(平均年齡10.4歲),其中男童18例,女童12例,均為身高正常,無(wú)心、肝、腎、甲狀腺等疾病的健康兒童。兩組年齡、性別比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。2標(biāo)本采集:實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組兒童夜間空腹10-14h,均于清晨安靜時(shí)采血4ml,所有標(biāo)本立即離心

6、分離血清,置于-80℃冰箱保存待測(cè)生長(zhǎng)激素受體。3實(shí)驗(yàn)過(guò)程:使用武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司提供生長(zhǎng)激素受體試劑盒(ELISA),嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,以anthos htll全自動(dòng)定量酶標(biāo)儀測(cè)得吸光度(OD值)。4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:所有統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示。所有資料進(jìn)行方差齊性及正態(tài)分布的檢驗(yàn),兩組間比較用t檢驗(yàn),兩變量之間相關(guān)性用Pearson相關(guān)分析。設(shè)定α=0.05,若P＜

7、0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P＜0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:ISS組患兒血清GHR水平低于正常對(duì)照組,ISS組血清GHR水平為(3.502±4.675ng/ml),正常對(duì)照組血清GHR水平為(6.454±6.223ng/ml),矮小組血清GHR水平低于對(duì)照組,兩組統(tǒng)計(jì)學(xué)比較有顯著性差異(P＜0.05)。ISS組血清GHR水平與年齡、身高、體重均呈正相關(guān)(r=0.441,r=0.407,r=0.443)。正常對(duì)照