反復熱性驚厥大鼠體內(nèi)皮質(zhì)醇和細胞因子變化的研究.pdf

1、目的：了解反復熱性驚厥(febrileseizures，F(xiàn)S)大鼠體內(nèi)糖皮質(zhì)激素、IL一1p、IL-1Ra、IL-6和TNF-q,水平的變化特點，以探討反復FS病理生理學機制。 方法：實驗選用清潔級21日齡雄性SD大鼠，隨機分為3組：正常對照組(NC組)，高熱對照組(HC組)和熱性驚厥組(FS組)。采用熱水浴法建立FS大鼠模型，隔日誘發(fā)驚厥一次，共10次，分別記錄每次驚厥的潛伏期、驚厥級別、驚厥持續(xù)時間及驚厥時肛溫。HC組采用相

2、同水溫下定時(3min)浸浴的方法建立，隔日浸浴一次，共10次，記錄每次熱水浴后的肛溫；NC組不進行任何處理。末次驚厥后12小時處死動物，用ELISA方法測大鼠海馬勻漿和血清中糖皮質(zhì)激素、IL-1β、IL-1Ra、IL-6和TNF-α的濃度；用RT-PCR方法測大鼠海馬IL-1β、IL-1Ra、IL-6和TNF-αmRNA的表達；使用電鏡觀察大鼠海馬CAl區(qū)神經(jīng)元、線粒體的超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果：(1)動物模型建立：FS組大鼠存活

3、13只，共誘導大鼠FS130次，平均驚厥潛伏期為(4.21±0.75)min；平均驚厥持續(xù)時間為(3.14±1.68)min；HC組出水平均肛溫(42.76±0.57)℃與FS組(42.87±0.50)℃比較無明顯差異(t=1.54，P＞0.05)，能起到理想的對照作用。 (2)海馬CAl區(qū)超微結(jié)構(gòu)：FS組大鼠海馬CAl區(qū)出現(xiàn)少數(shù)(6個/100個)神經(jīng)元腫脹，線粒體腫脹、變形，線粒體嵴模糊或消失；也有(16個/100個)表現(xiàn)為核

4、染色質(zhì)靠邊，胞質(zhì)致密等凋亡征象。 (3)血清、海馬皮質(zhì)醇水平：FS組大鼠血清、海馬皮質(zhì)醇水平[分別為(26.57±15.94)ng／ml、(4.11±1.74)ng／ml]明顯低于HC組[分別為(40.04±15.72)ng／ml、(6.70±3.45)ng/ml](P<0.05)。HC組大鼠血清皮質(zhì)醇水平明顯高于NC組[(22.74±12.97)ng/ml](P<0.05)。FS組大鼠血清、海馬皮質(zhì)醇水平與NC組比較，HC組大

5、鼠海馬皮質(zhì)醇水平與NC組[(5.65±2.90)ng/ml]比較均無顯著性差異(均P>0.05)。 (4)海馬IL-1βmRNA及其蛋白水平：各組大鼠血清中IL-1β濃度未測出。FS組大鼠海馬IL-lβmRNA及其蛋白水平[分別為(0.680±0.067)、(4.73±1.25)ng/mg]明顯高于HC組[分別為(0.492±O.176)、(3.21±0.54)ng/mg]和NC組大鼠[分別為(0.490±0.140)、(3.3

6、7±0.87)ng/mg](P<0.05或P<0.01)。NC組與HC組大鼠海馬IL-1βmRNA及其蛋白水平差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 (5)海馬IL-1RamRNA及其蛋白水平：各組大鼠血清IL-1Ra水平未測。FS組大鼠海馬IL-1RamRNA及其蛋白水平[分別為(0.438±O.113)、(18.89±5.70)ng/mg]明顯高于HC組[分別為(0.305±O.110)、(13.57±4.60)ng/mg]和N

7、C組[分別為(0.225±0.054)、(11.88±4.42)ng/mg](P＜0.05或P<0.01)。HC組與NC組大鼠海馬IL-1RamRNA及其蛋白水平無顯著性差異。各組大鼠海馬IL-1Ra/IL-1β比值差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 (6)海馬IL-6mRNA及其蛋白水平：各組大鼠血清IL-6濃度未測出。FS組和HC組大鼠海馬IL-6含量[分別為(53.21±8.32)ng/mg、(56.37±2.84)ng/

8、mg]明顯高于NC組[(44.55±4.11)ng/mg](P<0.01或P<0.05)。FS組和HC組大鼠海馬IL-6含量比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。各組大鼠海馬IL-6mRNA含量之間的比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 (7)海馬TNF-αmRNA及其蛋白水平：各組大鼠血清TNF-α濃度未測出。各組大鼠海馬TNF-αmRNA及其蛋白水平比較均無統(tǒng)計學意義(P>O.05)。 (8)相關(guān)分析：血清皮質(zhì)醇水平和海馬

9、皮質(zhì)醇含量之間(r=0．400，P<0．05)、海馬IL-IRa含量和海馬IL-1β含量之間(r=0.384，P<0.05)、海馬IL-1Ra含量和海馬IL-1IRa/IL-1β比值之間(r=0.766，P<0.01)、海馬IL-6含量與海馬IL-1β含量之間(r=0.536，P<0.01)、海馬IL-1βmRNA含量與海馬IL-1RamRNA含量之間(r=0.618，P<0.01)、海馬IL-1β含量與海馬IL-1βmRNA含量之間(

10、r=0.820，P<0.001)均存在正相關(guān)關(guān)系。大鼠海馬IL-1Ra含量和海馬皮質(zhì)醇含量呈負相關(guān)關(guān)系(r=-0.373，P<0.05)。其余各指標之間未發(fā)現(xiàn)直線相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論： (1)短期內(nèi)反復FS可導致海馬神經(jīng)元的損傷。 (2)反復FS可抑制發(fā)熱導致的海馬皮質(zhì)醇水平的升高；皮質(zhì)醇未參與反復FS導致的腦損傷過程。 (3)IL-1系統(tǒng)參與了FS的病理生理學改變；IL-6和TNF-α與FS相關(guān)腦損傷的產(chǎn)生