N-乙酰-L半胱氨酸對體外培養(yǎng)小鼠卵母細胞老化的影響.pdf

1、卵母細胞老化會造成卵母細胞質(zhì)量下降，影響早期胚胎發(fā)育以及出生后代的健康。老化的卵母細胞最顯著的特征是孤雌激活率上升、MPF活性下降，皮質(zhì)顆粒排出異常，透明帶硬化，受精率下降，易引起基因突變，最終導致細胞凋亡或壞死，妊娠失敗。
　　當卵母細胞發(fā)生老化時，細胞內(nèi)代謝異常，引起線粒體活性改變，導致電子呼吸鏈傳遞電子過程中，一些電子發(fā)生“逃逸”，并與細胞內(nèi)其他物質(zhì)相結合，使細胞內(nèi)氧自由基積累。卵母細胞可以利用谷胱甘肽將其清除，但隨著老化的

2、進行，GSH逐漸消耗，導致胞內(nèi)ROS水平上升，從而引起細胞凋亡，影響卵母細胞質(zhì)量。
　　現(xiàn)有研究表明，N-乙酰-L半胱氨酸作為谷胱甘肽合成前體、具有抗氧化能力，可以有效清除氧自由基。為探究NAC在排卵后小鼠卵母細胞老化過程中的作用及相關機制，本實驗通過添加有不同濃度NAC的培養(yǎng)液，對卵母細胞體外培養(yǎng)12小時，以新鮮卵母細胞為對照，檢測并對比多項影響卵母細胞質(zhì)量的重要指標，如孤雌激活率、ROS水平、線粒體活性及排布、透明帶硬化程度、

3、體外受精后的受精率與早期胚胎發(fā)育狀況等，以探宄NAC對卵母細胞老化是否有延緩作用及相關分子機制，得出結果如下:
　　(1)添加NAC，可顯著降低排卵后老化卵母細胞對孤雌活化的敏感性，并提高其MPF活性，延緩卵母細胞老化。而添加濃度為2 mM以上(包括2 mM)的NAC具有較顯著的延緩作用;
　　(2)在卵母細胞體外培養(yǎng)過程中，添加2 mM NAC促進卵母細胞內(nèi)谷胱甘肽合成，維持適宜的GSH/GSSG比例，以提高卵母細胞的氧化