L-精氨酸聯(lián)合氨基胍應(yīng)用對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、目的：通過(guò)聯(lián)合應(yīng)用一氧化氮供體L-精氨酸(L-Arginine，L-Arg)和選擇性iNOS抑制劑氨基胍(Amino guanidine，AG)，觀察對(duì)腦缺血再灌注后神經(jīng)元損傷的影響，為治療腦缺血再灌注損傷提供新的方法。
　　方法：實(shí)驗(yàn)用SD雄性大鼠，采取大腦中動(dòng)脈線栓法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusionand，MCAO)，缺血時(shí)間為2h，再灌注70h。實(shí)驗(yàn)分為4部分進(jìn)

2、行:
　　1.再灌注后不同時(shí)間給予L-Arg的作用:實(shí)驗(yàn)分為4組(n=6-9):vehicle組、早期給藥組、晚期給藥組和全程給藥組。全程給藥的時(shí)間點(diǎn)是腦缺血發(fā)生后2h，12h，24h，36h，48h，60h;早期給藥的時(shí)間點(diǎn)僅為腦缺血發(fā)生后2h;晚期給藥的時(shí)間點(diǎn)是缺血發(fā)生后2h以后的其它所有時(shí)間點(diǎn)。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)注射L-Arg300mg/kg一次。
　　2.全程應(yīng)用L-Arg聯(lián)合晚期應(yīng)用AG的治療作用:實(shí)驗(yàn)分為5組(n=9):

3、vehicle組、AG50mg/kg組、AG100mg/kg組、AG200mg/kg組和AG300mg/kg組。全程應(yīng)用L-Arg的時(shí)間點(diǎn)為全程給藥時(shí)間點(diǎn)，劑量是300mg/kg;晚期聯(lián)合AG給藥的時(shí)間點(diǎn)為晚期給藥時(shí)間點(diǎn)。
　　3.同時(shí)聯(lián)合L-Arg和AG的治療作用:實(shí)驗(yàn)分為5組(n=9):vehicle組、差時(shí)給藥組、2h同時(shí)給藥組、12h同時(shí)給藥組、和24h同時(shí)給藥組。其中差時(shí)給藥組的給藥方法同第二部分中AG200mg/kg組

4、，其余3個(gè)用藥組分別在2h，12h，24h這3個(gè)時(shí)間點(diǎn)開(kāi)始聯(lián)合用藥，L-Arg的劑量是300mg/kg，AG的劑量是200mg/kg。
　　4.L-Arg和AG聯(lián)合應(yīng)用與單獨(dú)應(yīng)用L-Arg或AG治療作用的比較。實(shí)驗(yàn)分為4組（n=6-9）:vehicle組、L-Arg聯(lián)合AG組、L-Arg組和AG組。L-Arg聯(lián)合AG組全程時(shí)間點(diǎn)給予L-Arg和AG; L-Arg組僅在早期給藥時(shí)間點(diǎn)給予L-Arg一次;AG組給藥時(shí)間為晚期給藥時(shí)間點(diǎn)

5、;L-Arg劑量為300mg/kg，AG劑量為200mg/kg。
　　以上各部分的vehicle組均在全程給藥時(shí)間點(diǎn)注射生理鹽水，各組大鼠給藥方式均為腹腔注射。每組大鼠均在全程給藥時(shí)間點(diǎn)后0.5h測(cè)量平均動(dòng)脈壓和體溫，并于再灌注后70小時(shí)處死取材，采用氯化三苯基四氮唑(2，3，5-Triphenyltetrazoliumchloride，TTC)染色法分別測(cè)定患側(cè)腦皮質(zhì)和紋狀體梗死體積百分比。
　　結(jié)果：各部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:

6、
　　1.與vehicle組比較，早期給藥組大鼠大腦皮質(zhì)梗死體積明顯減少(P＜0.05），而晚期給藥組和全程給藥組大鼠大腦皮質(zhì)梗死體積則有明顯增加(P＜0.05）。
　　2.與vehicle組比較，AG100mg/kg組、AG200mg/kg組、AG300mg/kg組大鼠大腦皮質(zhì)梗死體積均明顯減少(P＜0.05)，與AG100mg/kg組比較，AG200mg/kg組、AG300mg/kg組大鼠大腦皮質(zhì)梗死體積明顯減少(P＜0

7、.05)，而與200mg/kg組比較，300mg/kg組大鼠大腦皮質(zhì)梗死體積變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.與vehicle組比較，其余四組大鼠大腦皮質(zhì)梗死體積均有明顯減少(P＜0.05)，而與差時(shí)給藥組比較，2h同時(shí)給藥組大鼠大腦皮質(zhì)梗死體積變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.與vehicle組比較，其余三組大鼠大腦皮質(zhì)梗死體積均明顯減少(P＜0.05），而與L-Arg聯(lián)合AG組比較，L-Arg組與AG組的大腦皮質(zhì)梗死體積均明顯增加(