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文檔簡介
1、目的: 建立AD大鼠模型,探討針灸預(yù)處理對(duì)老年性癡呆模型大鼠Wnt1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,揭示針灸防治AD的機(jī)制。 方法: 在大鼠雙側(cè)海馬區(qū)注射Aβ25-35,建立AD大鼠模型,分別隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組、預(yù)艾灸組、預(yù)電針組、預(yù)電針加灸組,一共6組,每組各20只。通過預(yù)電針和預(yù)艾灸大鼠的百會(huì)和腎俞穴28天后,觀察各組大鼠wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)指標(biāo)的變化。通過Morris水迷宮檢測(cè)行為學(xué),免疫組化和免疫印跡檢測(cè)
2、大鼠海馬組織軸蛋白和β—連環(huán)蛋白,通過酶聯(lián)免疫法檢測(cè)蛋白質(zhì)磷酸酶2A和糖原合酶激酶-3β的活性,通過實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)Wnt1基因表達(dá),并通過超微電鏡觀察海馬組織超微病理變化。 結(jié)果: 1.水迷宮檢測(cè)行為學(xué)發(fā)現(xiàn)模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力有明顯損害,其平均潛伏期、經(jīng)過中心區(qū)域的比例、平均游過的路徑距離與正常組和假手術(shù)組有顯著差異(p<0.01),而預(yù)電針和預(yù)艾灸對(duì)其有明顯的預(yù)防和改善作用,其中以預(yù)電針加灸的療效最好。
3、 2.通過免疫組化和免疫印跡觀察到模型組大鼠海馬組織軸蛋白表達(dá)明顯上調(diào),β—連環(huán)蛋白表達(dá)明顯下調(diào),而預(yù)艾灸、預(yù)電針、預(yù)電針加灸對(duì)此具有不同程度的調(diào)節(jié)作用。 3.通過酶聯(lián)免疫法觀察到模型組GSK-3β的活性比正常組亦明顯升高(p<0.01),而PP2A的活性比正常組和假手術(shù)組明顯降低。預(yù)電針和預(yù)艾灸均可起到調(diào)節(jié)作用。 4.病理組織切片觀察到AD大鼠腦組織海馬區(qū)神經(jīng)元均有不同程度的破壞,預(yù)電針和預(yù)艾灸對(duì)海馬區(qū)神經(jīng)元的損傷具
4、有明顯的保護(hù)作用。 5.通過實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)Wnt1基因表達(dá),觀察到模型組大鼠海馬Wnt1信號(hào)異常減弱,與正常組和假手術(shù)組比較有顯著性差異(p<0.01)。而預(yù)艾灸組、預(yù)電針組、預(yù)電針加灸組大鼠海馬Wnt1的信號(hào)均有不同程度的增強(qiáng)。 結(jié)論: 1.老年性癡呆的基本病機(jī)為髓海不足、神機(jī)失用,針灸治療的法則為益精填髓,醒神開竅。百會(huì)和腎俞可作為防治該病的首選要穴。 2.預(yù)電針和預(yù)艾灸對(duì)于AD模型大鼠的神經(jīng)
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