NPRL2、survivin在肝細胞肝癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、目的：肝細胞肝癌(Hepatocellulur carcinoma，HCC)是我國常見的惡性腫瘤之一，目前隨著醫(yī)療技術的迅猛發(fā)展，HCC的臨床早期診斷、治療、預后等較前有了明顯提高和改善，但是其病死率仍然居高不下?；蛲蛔冊贖CC的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要意義，其可導致多種原癌基因的激活、抑癌基因的失活。NPRL2（nitrogen permease regulator-like2）是在肺癌中發(fā)現的一種候選腫瘤抑制基因，表達于肝臟、肺、腎

2、臟等多種正常組織中，但是在結直腸癌、肺癌等惡性腫瘤中表達下調。然而，目前有關NPRL2在HCC中的研究報道較少。Survivin屬于凋亡抑制蛋白家族成員，具有調節(jié)細胞分裂、抑制細胞凋亡、參與腫瘤的血管形成等多種功能。據文獻報道，幾乎所有惡性腫瘤（如肺癌、乳腺癌等）中均存在survivin基因的表達異常。PI3K/PDK1/AKT信號轉導通路在細胞穩(wěn)態(tài)的維持、細胞增殖的調控等方面有重要作用，其調控異常可參與腫瘤的形成。有研究表明，NPRL

3、2、survivin基因均參與PI3K/PDK1/AKT信號通路的調控，但是生物學效應相反[7]。然而，至今尚無文獻報道NPRL2和survivin兩者之間是否存在相關性。本實驗采用RT-PCR法、免疫組織化學方法，分別從RNA、蛋白質水平上探討NPRL2、survivin在HCC組織中的表達情況及其與各臨床病理學指標之間的關系，并分析兩者之間的聯系，從而指導其在肝細胞肝癌中的臨床應用。
　　方法：在2013年5月至2014年6月

4、期間，我們收集了山東省立醫(yī)院行肝癌切除術的肝細胞肝癌組織標本及其對應的癌旁組織標本共計45例，以及行肝臟血管瘤切除術的正常肝臟組織標本15例。部分組織標本提取RNA，采用RT-PCR方法檢測HCC組織、癌旁組織以及正常肝臟組織中NPRL2、survivin的表達情況。取部分組織標本做成組織蠟塊并切片，應用免疫組織化學法觀察各組織中NPRL2、survivin的表達水平。同時收集所有HCC患者的臨床病理資料，探究NPRL2、survivi

5、n與各臨床病理學指標之間的關系。
　　結果：⑴RT-PCR結果分析顯示，HCC組織中NPRL2 mRNA的表達量低于其相應的癌旁組織和正常肝臟組織(P＜0.01)，各組織的相對表達量分別為0.36±0.06、0.52±0.07、0.55±0.07。免疫組織化學結果表明，NPRL2蛋白在正常肝臟組織和癌旁組織中的表達量均高于HCC組織(P＜0.01)，其陽性表達率分別為86.67％(13/15)、93.33％(42/45)、33.3

6、3％(15/45)。NPRL2 mRNA、蛋白質在正常肝臟組織及其癌旁組織中的表達情況比較，差異均無統計學意義(P＞0.05)。⑵Survivin mRNA在HCC組織(1.47±0.08)中的表達量明顯高于其相應的癌旁組織（0.78±0.05）、正常肝臟組織（0.76±0.06）(P＜0.01)。免疫組化染色結果顯示，survivin蛋白在HCC組織中的表達明顯高于癌旁組織和正常肝臟組織(P＜0.01)，各組織的陽性率分別為64.44

7、％(29/45)、8.89％(4/45)、20％(3/15)。然而，survivin mRNA和蛋白質在正常肝臟組織和癌旁組織中的表達無明顯差異(P＞0.05)。⑶通過免疫組織化學結果分析，結合HCC患者的臨床病理資料，NPRL2、survivin在HCC組織的表達情況均與患者的年齡、性別、腫瘤大小、有無門靜脈癌栓的形成及HBsAg、HBeAg、 HBV-DNA是否陽性等無相關性(P＞0.05)，但是與淋巴結轉移、腫瘤的TNM分期有關(

8、P＜0.05)。另外，survivin的表達還與血清AFP濃度有關(P＜0.05)。⑷Spearman等級相關分析結果顯示，在肝細胞肝癌組織中，NPRL2、survivinmRNA的表達呈負相關(r=-0.45，P＜0.01)。
　　結論：在肝細胞肝癌中，NPRL2是一種新近發(fā)現的腫瘤抑制基因，而survivin是一種凋亡抑制基因，并且NPRL2、survivin的表達存在負相關的關系，兩者共同參與了HCC的發(fā)生和發(fā)展，這為腫瘤的