CoQ10對Cr(Ⅵ)誘導(dǎo)的L-O2肝細(xì)胞凋亡的干預(yù)作用研究.pdf

1、中圖分類號UDCR114610學(xué)校代碼密級10533碩士學(xué)位論文00010對Cr(Ⅵ)誘導(dǎo)的L02肝細(xì)胞凋亡的干預(yù)作用研究TheinterventioneffectofCoQlOonCr(VI)一inducedapoptosisinL02hepatocytes作者學(xué)科研究學(xué)院(指導(dǎo)鐘霞麗公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)衛(wèi)生毒理學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院鐘才高教授論文答辯日期塑堂：主!圓答辯委員會主席中南大學(xué)2014年5月飛毒S∥乙／”課題來源：國家自然科學(xué)基金項

2、目，項目批準(zhǔn)號：30972551和81172701名業(yè)向所師姓專方豕教碩士學(xué)位論文中文摘要中文摘要目的：進(jìn)一步了解Cr(Ⅵ)的毒作用機(jī)制，尋找C“Ⅵ)的解毒劑，為防治Cr(Ⅵ)的職業(yè)損害和促進(jìn)人群健康提供實驗依據(jù)。方法：L02肝細(xì)胞為受試細(xì)胞，Cr(Ⅵ)和CoQl0為受試物，通過MTT實驗，確定Cr(Ⅵ)和CoQl0的處理濃度。采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的凋亡率，westemblot法檢測相關(guān)蛋白(CytC、Bcl2和BaX)的表達(dá)，分別使

3、用DCFHDA和JC1探針檢測ROS和Axlrrn的生成；用caspaSe試劑盒檢測caspase一3和caspase9的活性；用多功能酶標(biāo)儀檢測細(xì)胞內(nèi)ATP、MDA、SOD的含量，用熒光分光度計檢測PTP、02“及的Ca2熒光強(qiáng)度；用高效液相色譜法檢測線粒體內(nèi)CoQl0的含量，采用實時熒光定量PCR檢測COQ2和COQ4基因的表達(dá)。結(jié)果：1隨著Cr(Ⅵ)的濃度增加，L02肝細(xì)胞的生存率明顯下降(p005)，而10和20M的CoQl0抑

4、制細(xì)胞的生長，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(pO05)。本研究以1、2、4rtM為Cr(Ⅵ)的染毒濃度，為研究CoQl0的保護(hù)作用，處理組為2ttMC“Ⅵ)25pMCoQl0。2隨著Cr(E)染毒濃度的增加，凋亡率升高(正O05)，加入CoQl0的肝細(xì)胞跟單獨用2州C“Ⅵ)組相比，凋亡率降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(∥005)。3用不同濃度的c“Ⅵ)處理L02肝細(xì)胞24h后，用高效液相色譜檢測細(xì)胞線粒體內(nèi)CoQl0的含量，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算CoQl0的含

5、量，隨著C“Ⅵ)濃度的增加，線粒體內(nèi)CoQl0的含量減少，且跟對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(／7005)。而用CoQl0預(yù)處理再用20MCr(Ⅵ)處理組與單獨用2pMC“Ⅵ)處理組相比，CoQl0的含量有所增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(廬O05)。C“Ⅵ)使編碼CoQl0合成路徑酶的基因COQ2和COQ4表達(dá)下調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(西005)，而用CoQl0預(yù)處理再用2斗MC“Ⅵ)處理組與單獨用2pMCr(Ⅵ)處理組相比，COQ2和COQ4的