TNF配體相關(guān)分子 1A在病毒性心肌炎中的表達(dá)及黃芪甲甙干預(yù)研究.pdf

1、第一部分：TL1A 在病毒性心肌炎小鼠心肌中的表達(dá) 目的:TNF 配體相關(guān)分子1A（TL1A）是一種含251 個氨基酸的Ⅱ型跨膜蛋白，屬于TNF 超家族的一個新成員。有研究發(fā)現(xiàn)TNF 參與病毒性心肌炎（VMC）的發(fā)生發(fā)展。而作為TNF 超家族的成員，TL1A 亦參與許多炎癥疾病的發(fā)生發(fā)展過程。本實驗旨在研究TL1A 在病毒性心肌炎小鼠心肌中表達(dá)的動力學(xué)特征，探討其在病毒性心肌炎發(fā)病學(xué)中的意義。 方法:取Balb/c小鼠8

2、0 只，分為實驗組70 只，對照組10 只。實驗組小鼠每只腹腔注射0.1mL內(nèi)含1×102TCID50 CVBB3 的Eagle’s培養(yǎng)液，對照組小鼠每只腹腔注射不含病毒的Eagle’s培養(yǎng)液0.1mL。實驗組小鼠分別于接種病毒后3、7、15、30d隨機各取10 只處死，對照組小鼠在接種后30 天處死作為總體對照。采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）及免疫組化等方法半定量檢測VMC小鼠不同時點心肌TL1A基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)水平。

3、 結(jié)果:VMC小鼠在接種病毒后3d 心肌TL1A mRNA 及蛋白表達(dá)水平升高，7d 表達(dá)水平最高，此后其表達(dá)逐漸下降，但30d 仍維持在一個較高水平,各時點TL1A mRNA 及蛋白表達(dá)水平與對照組相比，差異均有顯著性。 結(jié)論:CVB3病毒感染可引起TL1A表達(dá)上調(diào)，TL1A表達(dá)增加可能在CVB3病毒性心肌炎發(fā)病機制中起重要作用。 第二部分：黃芪甲甙對病毒性心肌炎小鼠心肌中TL1A 表達(dá)的影響 目的:黃芪甲甙

4、是中藥黃芪有效成份皂甙的單體成份，對急、慢性病毒性心肌炎與病毒性擴張型心肌病均有明顯的保護和治療作用。本實驗研究黃芪甲甙干預(yù)的病毒性心肌炎小鼠中TL1A 表達(dá)的影響，探討黃芪甲甙治療病毒性心肌炎的作用機制。 方法:取Balb/c小鼠100 只，隨機分成6 組。非感染小鼠腹腔無菌注射不含病毒的Eagle’s培養(yǎng)液0.1mL，分為正常對照組（A組，10 只，以羧甲基纖維素鈉0.1mL灌胃7d）、高劑量對照組（B組，10 只，9％黃芪

5、甲甙0.1mL灌胃7d）；余80 只小鼠以腹腔無菌注射0.1mL內(nèi)含1×102TCID50 CVB3 的Eagle’s培養(yǎng)液制作VMC模型，VMC小鼠隨機分為心肌炎對照組和低、中、高劑量干預(yù)組，分別以生理鹽水、1％、3％、9％黃芪甲甙（分別為0.07、0.2、0.6g/kg.d）0.1mL灌胃7d（分別為C、D、E、F組，每組20 只）。14d后處死全部小鼠并取其心臟。采用RT-PCR及免疫組化分別檢測心肌TL1A mRNA及蛋白表達(dá)水

6、平。 結(jié)果:正常對照組和高劑量對照組無小鼠死亡,然而心肌炎對照組有大量小鼠死亡，死亡率為45％（9/20），低、中、高劑量干預(yù)組小鼠死亡率分別為30％（6/20）、25％（5/20）、10％（2/20），高劑量干預(yù)組小鼠死亡率較心肌炎對照組明顯降低，而低、中劑量干預(yù)組小鼠死亡率與心肌炎對照組比較，差異無顯著性；正常對照組和高劑量對照組心肌未見任何病理改變，然而兩組心肌中均有一定量的TL1A mRNA 及蛋白表達(dá)，兩組比較，差異無