缺鐵脅迫下小金海棠根部鐵高效相關蛋白的表達及其屬性鑒定.pdf

1、鐵是植物生長發(fā)育所必需的營養(yǎng)元素之一。雖然地殼中含鐵豐富，但絕大多數的植物缺乏從土壤中有效吸收鐵的活性機制，因而會表現出缺鐵脅迫癥狀。缺鐵將嚴重影響植物的生長發(fā)育，為研究耐缺鐵植物的抗缺鐵機制，解決植物缺鐵黃化的問題，本研究以耐缺鐵的蘋果屬植物小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)為試材，通過蛋白質組學的技術 (雙向電泳技術，質譜技術，生物信息學技術)手段研究缺鐵脅迫下小金海棠根部蛋白質表達模式的

2、變化情況，分離與鑒定其鐵高效相關蛋白，以探明其耐缺鐵的機理。將組培生根的小金海棠進行24小時和72小時的缺鐵處理(0 μmol/L FeNa-EDTA)，以全營養(yǎng)液培養(yǎng)(含40 μmol/L FeNa-EDTA)為對照。選取白色的初生根，采用改良的TCA/丙酮法進行總蛋白的提取。利用雙向凝膠電泳技術對根部總蛋白樣品進行分離，共得到700多個重復性好的蛋白點。對其中17個上調表達的蛋白點進行了MALDI-TOF質譜分析。用獲得的肽質量指紋

3、圖譜數據進行蛋白質的檢索與鑒定，共有13個蛋白質得到了鑒定。這些蛋白分屬于11個基因的表達產物。這些與小金海棠鐵高效相關的蛋白大多數為物質與能量代謝和抗逆與脅迫應答反應有關的蛋白，還有些蛋白是細胞骨架蛋白和參與膜轉運的蛋白。與物質和能量代謝有關的蛋白有UDP-葡萄糖焦磷酸化酶，果糖激酶和NAD依賴的異檸檬酸脫氫酶。在基礎代謝中具有重要作用的S-腺苷甲硫氨酸合成酶也得到了鑒定；與抗逆境脅迫有關的蛋白有單脫氫抗壞血酸還原酶，維生素B6合成蛋