BACP在細(xì)胞基因組穩(wěn)定性中的作用研究.pdf

1、BACP(BRCA1AssociatedCentrosomeProtein)是同BRCA1相互作用的中心體蛋白。生物信息學(xué)分析表明，BACP基因位于20p11.22-p11.1，編碼155,910Da的蛋白質(zhì)分子。BACP蛋白結(jié)構(gòu)中包含三個coiled-coils、兩個SMC和三個EF手等結(jié)構(gòu)域。通過GSTpull-down和免疫共沉淀實驗，證實BACP蛋白與BRCA1存在相互作用。借助細(xì)胞免疫熒光染色技術(shù)，確定BACP蛋白與gamma

2、-tubulin共定位于中心體，而且BACP蛋白與BRCA1存在共定位。在細(xì)胞周期的推進過程中，BACP蛋白在細(xì)胞中心體上的定位基本維持穩(wěn)定。通過RNA干擾技術(shù)抑制內(nèi)源性BACP蛋白表達(dá)后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞基因組穩(wěn)定性受到極大影響，表現(xiàn)為細(xì)胞出現(xiàn)微核，而且有絲分裂紡錘體結(jié)構(gòu)與功能、染色體分離和胞質(zhì)分裂均出現(xiàn)異常，最終形成多核細(xì)胞。在鑒定了NIH3T3BACP高表達(dá)細(xì)胞所致的裸鼠腫瘤后，使用BACP全長表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染食管癌KYSE150細(xì)胞系建立了