原發(fā)性視網(wǎng)膜色素變性家系和Usher綜合征家系臨床表型分析及致病基因研究.pdf

1、目的： 1．建立視網(wǎng)膜色素變性遺傳資源收集保存的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序。 2．分析3個(gè)RP家系RP-GC-001、RP-DX-002、RP-PG-003臨床表型及遺傳學(xué)特點(diǎn)，尋找致病基因突變。 3．分析2個(gè)Usher綜合征家系USH-001、USH-002的臨床表型特征及遺傳學(xué)特點(diǎn)，篩選可能的已知致病基因位點(diǎn)。 方法： 1．對RP患者進(jìn)行鑒定和臨床分型，分析其遺傳方式。收集、保存RP遺傳資源，包括患者及家

2、屬的知情同意、填寫RP調(diào)查表、抽取外周靜脈血制備基因組DNA的、提取基因組DNA、保存及鑒定基因組DNA。建立RP遺傳資源庫，包括紙質(zhì)檔案管理系統(tǒng)和電子檔案管理系統(tǒng)。 2．分析RP-GC-001、RP-DX-002、RP-PG-003家系患者的臨床表型特征、系譜特征，利用PCR擴(kuò)增和直接測序的方法并對RHO、RDS、ROM1、NRL、CRX等5個(gè)已知致病基因的15個(gè)外顯子進(jìn)行篩查。 3．分析USH-001、USH-002

3、家系患者的臨床表型特征、系譜特征，利用連鎖分析的原理和方法，對12個(gè)已知致病基因位點(diǎn)周圍的微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行掃描，篩選可能的致病基因位點(diǎn)。 結(jié)果： 1．建立了規(guī)范、科學(xué)、合理，并且符合國際、國內(nèi)遺傳資源采集研究原則要求的視網(wǎng)膜色素變性遺傳資源收集保存標(biāo)準(zhǔn)化操作系統(tǒng)。 2．RP-GC-001、RP-PG-002、RP-DX-003表型具有共性：夜盲、進(jìn)行性視野縮小、視網(wǎng)膜骨細(xì)胞狀色素沉著、視乳頭呈蠟黃色萎縮，表型垂直連

4、續(xù)傳遞，男女均可發(fā)病。同時(shí)又具個(gè)性特征：RP-DX-002家系中患者視網(wǎng)膜骨細(xì)胞樣色素沉著累及黃斑區(qū)和視乳頭旁，多個(gè)患者伴有虹膜局限性前粘連、玻璃體煙灰樣混濁。RP-PG-003家系患者在50歲左右出現(xiàn)急性閉角型青光眼。RP-GC-001家系中發(fā)現(xiàn)了RHO基因外顯子2編碼區(qū)403C＞T Arg135Trp R135W突變。RP-PG-002、RP-DX-003家系的RHO、RDS、ROM1、NRL、CRX基因未發(fā)現(xiàn)致病突變。 3

5、．USH-001、USH-002家系均表現(xiàn)為兒童期出現(xiàn)的雙耳聽力下降，為非漸進(jìn)性、中-重度感音神經(jīng)性耳聾，以高頻聽力損失為主，前庭功能正常。10-13歲出現(xiàn)夜盲癥狀，隨年齡增長夜盲逐漸加重，并出現(xiàn)視野逐漸縮窄至管狀視野，中心視力下降不明顯，臨床表現(xiàn)符合USH2型。表型未出現(xiàn)連續(xù)遺傳的現(xiàn)象，男女均有發(fā)病，患者的子女表型正常。USH-001家系中所有患者的D11S902、D17S785微衛(wèi)星標(biāo)記的Allele值完全一致，USH-002家系所

6、有患者的微衛(wèi)星標(biāo)記D1S425、D9S1776的Allele值完全一致。 結(jié)論： 1．視網(wǎng)膜色素變性遺傳資源收集保存標(biāo)準(zhǔn)化操作系統(tǒng)的建立，確保了本研究的規(guī)范性、保證了遺傳資源搜集工作良好的延續(xù)性以及我們后續(xù)基因定位克隆、分子流行病學(xué)研究、基因篩查工作結(jié)果的真實(shí)可靠。 2．RP-GC-001、RP-PG-002、RP-DX-003為常染色體顯性遺傳RP家系。RHO基因外顯子2編碼區(qū)403C＞T Arg135Trp