高糖下IGF1對內(nèi)皮細(xì)胞增殖及移行的影響.pdf

1、第一部分高糖下IGF1對內(nèi)皮細(xì)胞增殖移行影響的研究
　　目的:血管內(nèi)皮功能失調(diào)在糖尿病血管并發(fā)癥中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn)糖尿病患者心腦血管病變及周圍血管閉塞的風(fēng)險遠(yuǎn)高于非糖尿病患者。臨床研究發(fā)現(xiàn)高血糖與糖尿病血管病變有關(guān)，內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)可能繼發(fā)于高血糖。胰島素樣生長因子1(IGF1)是細(xì)胞生長、分化和凋亡的重要調(diào)節(jié)因子。FoxO(Forkhead box O)是Forkhead轉(zhuǎn)錄因子的一個亞家族，在哺乳動物細(xì)胞周期調(diào)控、凋亡、

2、應(yīng)激以及糖代謝調(diào)節(jié)中起著重要作用。FoxO1在內(nèi)皮細(xì)胞高表達(dá)。近年來研究證明IGF1具有多種代謝和血管保護(hù)作用，從很多方面直接對抗內(nèi)皮功能失調(diào)，目前關(guān)于IGF1的報道多關(guān)注于其在神經(jīng)損傷方面的研究，在血管保護(hù)方面的報道較少，且機(jī)制不清。本研究擬探討IGF1對高糖環(huán)境中的內(nèi)皮細(xì)胞增殖及移行的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。
　　方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells，HUV

3、EC)，倒置顯微鏡下觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)。亞融合狀態(tài)的血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)血清饑餓處理24小時后用于實驗。分為對照組(5mmol/L Gs)、高糖組(25mmol/L Gs)、高滲組(20mmol/L mannitol+5mmol/L Gs)、高糖+胰島素樣生長因子-1組(25mmol/L Gs+80ng/mL IGF1)。處理48h后，用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測內(nèi)皮細(xì)胞增殖情況，Transwell移行小室觀察細(xì)胞移行情況。實時熒光定量

4、PCR測定Akt mRNA及FoxO1 mRNA水平。免疫組化測定內(nèi)皮細(xì)胞Akt、p-Akt、FoxO1和p-FoxO1的蛋白表達(dá)情況，并經(jīng)行半定量分析，比較FoxO1/p-FoxO1、Akt/p-Akt的比值。
　　結(jié)果:內(nèi)皮細(xì)胞在高糖組的細(xì)胞存活率、移行率比對照組明顯降低(P<0.01，P<0.01)，F(xiàn)oxO1 mRNA表達(dá)明顯升高(P<0.01)，F(xiàn)oxO1/p-FoxO1蛋白表達(dá)增加(P=0.007)，Akt/p-Akt

5、比值增加(P<0.05)。與高糖組相比，高糖+IGF1組細(xì)胞存活率、移行率明顯增加(P<0.05，P<0.01)，F(xiàn)oxO1 mRNA的表達(dá)明顯增加(P<0.05)，F(xiàn)oxO1/p-FoxO1蛋白表達(dá)降低(P<0.05)，Akt/p-Akt蛋白表達(dá)降低(P=0.040)；高糖+IGF1+AZD5363組細(xì)胞存活率未見明顯差異(P>0.05)，移行未增加(P>0.05)，F(xiàn)oxO1 mRNA的表達(dá)明顯降低(P<0.05)，F(xiàn)oxO1/p-

6、FoxO1未見明顯差異(P>0.05)。五組Akt mRNA的表達(dá)無差異(F=0.39，P>0.05)。
　　結(jié)論:高糖環(huán)境下內(nèi)皮細(xì)胞的增殖移行能力降低與FoxO1的表達(dá)有關(guān)。IGF1能改善高糖對內(nèi)皮細(xì)胞增殖移行的抑制作用，其機(jī)制可能是IGF1激活A(yù)kt進(jìn)一步調(diào)節(jié)FoxO1，導(dǎo)致FoxO1磷酸化，去磷酸化FoxO1蛋白表達(dá)減少。
　　第二部分中國2型糖尿病患者血清IGF1與HDL-C的關(guān)系
　　目的：2型糖尿病(T2D

7、M)患者是脂代謝紊亂及動脈硬化的高發(fā)人群，關(guān)注IGF1在T2DM人群中的變化及對血脂的影響，對于認(rèn)識胰島素樣生長因子-1(IGF1)與T2DM患者動脈粥樣硬化的關(guān)系非常重要。本文探討中國T2DM患者患者血清IGF1和血脂水平的關(guān)系。
　　方法：檢測498例T2DM患者血清IGF1和總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、脂蛋白A(LpA)和脂蛋白B(LpB)的水平，并

8、按照第25、75百分位數(shù)將IGF1分為3組即低IGF1組(G1)、中間IGF1組(G2)和高IGF1組(G3)進(jìn)行比較。對IGF1與HDL-C的相關(guān)性進(jìn)行分析。
　　結(jié)果：與G2組比較，G1組BMI，F(xiàn)INS顯著升高，HDL-C顯著降低(P<0.05)；G3組HDL-C，2hPBG，F(xiàn)INS，2hPINS，WHR，HbA1c顯著降低(P<0.05)，冠心病患病率明顯降低(P<0.05)。校正年齡和性別后，血清IGF1水平與HDL-