阿苯噠唑?qū)︱球镜募?xì)胞和分子毒理機(jī)制研究.pdf

1、隨著集約化畜牧業(yè)的快速發(fā)展，獸藥的大量和不合理使用所引起的環(huán)境污染問題已引起了人們極大的關(guān)注。但目前所采用的個體水平上的急慢性毒理實(shí)驗(yàn)不能從本質(zhì)上反應(yīng)藥物作用于環(huán)境l生物的毒性效應(yīng)，尤其是潛在毒性。隨著分子生物學(xué)技術(shù)在生態(tài)毒理學(xué)中的應(yīng)用，使藥物殘留的l環(huán)境和食品安全的早期診斷成為可能。本研究以蚯蚓作為十壤環(huán)境的指示動物，從個體、組織、細(xì)胞、基岡水平上研究了獸藥阿苯噠唑(ABZ)對蚯蚓的毒理機(jī)制，從微觀水平對阿苯噠唑等抗寄生蟲藥物的環(huán)境安

2、全性評價提供依據(jù)。研究分為以下幾部分： 第一部分，從個體水平上研究了不同ABZ劑量對蚯蚓存活和生長率的影響。結(jié)果表明，糞便染毒14天蚯蚓的半數(shù)致死率為597 mg kg<'-1>。染毒42天的生長實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，劑量在30 mg kg<'-1>以下對蚯蚓生長沒有影響，而劑量在90 mg kg<'-1>以上在生長后期14～42天明顯降低了蚯蚓生長率。 第二部分，研究了ABZ染毒對蚯蚓體不同部位(前、中、后部)的組織酶活性的變

3、化。測定了1OO，200，400，600 mg kg<-1>濃度下，第2，7，14天酸性磷酸酶(．AP)、三磷酸腺苷酶(ArPase)和谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GS3’)活性的變化。結(jié)果表明，組織酶活性與染毒濃度、暴露時問和蚯蚓體的部位密切相關(guān)。染毒時問越長，毒性反應(yīng)越明顯，其中AP、AI’。Pase對較低濃度反應(yīng)比較敏感，14d時在lOO mg kg<'-1>的酶活性被顯著性抑制，但對AP的活性變化比較敏感的部位是前部，而ATPase敏感部

4、位是中部和后部，這可能與該部位的結(jié)構(gòu)和功能有關(guān)。 第三部分，研究了ABZ染毒對蚯蚓的細(xì)胞毒性。實(shí)驗(yàn)測定了在低濃度(100 mg kg<'-1>)和高濃度(600 mg kg<'-1>)兩種情況下，第14天的組織細(xì)胞顯微和超顯微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果表明，低濃度染毒使皮膚角質(zhì)層變厚，表現(xiàn)出蚯蚓的皮膚防御機(jī)制；但濃度達(dá)到600 mg kg<'-1>時，皮膚角質(zhì)層變薄，皮膚防御受到破壞；腸道上皮細(xì)胞的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超顯微結(jié)構(gòu)隨著染毒濃度增

5、加損傷程度增加，600 mg kg<'-1>時，染色質(zhì)發(fā)生凝聚或邊集；貯精囊在100 mg kg<'-1>時發(fā)生了嚴(yán)重?fù)p傷，大量精子細(xì)胞的細(xì)胞核變形、細(xì)胞膜擴(kuò)張、線粒體空泡化、微管系統(tǒng)破壞、糖原分布紊亂等病變?？磥恚珹BZ染毒對蚯蚓的繁殖毒性比較大。 第四部分，研究了ABZ染毒的蚯蚓分子毒性。采用熒光定量RT-PCR技術(shù)，研究了不同劑量ABZ對蚯蚓不同部位的I-rRNA和Hsp90基因表達(dá)的影響。這兩個基因與能量代謝有密切聯(lián)系。