人早期胚胎形態(tài)評分系統(tǒng)的建立和臨床應用的研究.pdf

1、目的：(1)探討多個原核期形態(tài)學指標與Day3(取卵后第三天)胚胎著床之間的關(guān)系，驗證并篩選能正確反映胚胎移植后種植潛能的原核期形態(tài)指標；(2)探討多個Day3胚胎形態(tài)學指標和胚胎著床的關(guān)系，篩選能正確反映胚胎移植后種植潛能的Day3胚胎形態(tài)指標；(3)根據(jù)篩選的原核期和Day3胚胎形態(tài)觀察指標，建立原核期胚胎評分、Day2(取卵后第二天)胚胎評分、Day3胚胎評分及Day3聯(lián)合原核綜合評分系統(tǒng)。 方法：前瞻性分析2004年10

2、月～2005年1月，在南方醫(yī)院生殖醫(yī)學中心接受輔助生殖治療的166位不孕患者。(1)166位不孕患者中，選取年齡均≤35歲，HCG日子宮內(nèi)膜厚度均8mm，且Day3進行胚胎移植后100％植入的共30個移植周期患者(56個胚胎，植入組)，同時隨機選取滿足上述條件的100％未植入32個移植周期患者(64個胚胎，未植入組)。根據(jù)原核期形態(tài)包括兩原核是否相鄰、大小、居于胞漿中的位置，核仁前體(Nucleolarprecursorbodies，N

3、PB)的排列方式、大小、數(shù)目，極體是否完整，胞漿暈的有無，胞質(zhì)顏色及顆粒是否正常，胞質(zhì)內(nèi)空泡的有無進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，比較原核期形態(tài)與胚胎種植成功與否之間的相關(guān)性。(2)相同62個移植周期患者，根據(jù)Day3胚胎形態(tài)包括卵裂球數(shù)目、卵裂球大小差異、卵裂球核、卵裂球顏色及顆粒、碎片比例和碎片類型、胞質(zhì)內(nèi)空泡、透明帶厚度及形狀方面進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，比較Day3胚胎形態(tài)與胚胎種植成功與否之間的相關(guān)性。(3)根據(jù)上述實驗結(jié)果，選取原核期兩原核形態(tài)、NPB形

4、態(tài)、胞質(zhì)顆粒，卵裂期卵裂球數(shù)、卵裂球核、卵裂球大小差異、碎片多少及碎片類型8個指標進行觀察，建立原核期評分，Day2胚胎評分，Day3胚胎評分及Day3聯(lián)合原核綜合評分四種評分系統(tǒng)。166個移植周期患者共移植胚胎381個，每一個移植胚胎質(zhì)量用四種評分系統(tǒng)評價。第一個評分系統(tǒng)中，以原核期形態(tài)單獨評估預測妊娠結(jié)局；第二個評分系統(tǒng)中以Day2胚胎形態(tài)為評分標準；第三個評分系統(tǒng)中以Day3胚胎形態(tài)為評分標準；第四個評分系統(tǒng)中Day3胚胎形態(tài)聯(lián)合

5、原核期形態(tài)綜合評分，最高為120分。 結(jié)果：(1)原核期兩原核狀態(tài)、位置及大小均與胚胎是否種植有明顯的相關(guān)性，植入組中兩原核相鄰、居中、大小一致的出現(xiàn)率明顯高于未植入組(P＜0.05)，其發(fā)育而來的Day3胚胎種植率明顯增高。NPB排列方式、數(shù)目及大小均與胚胎是否種植有明顯的相關(guān)性，植入組中以NPB均線性排列、數(shù)目3～7個、中等大小出現(xiàn)率明顯高于未植入組(P＜0.05)，其發(fā)育而來的Day3胚胎種植率明顯增高。胞漿形態(tài)中胞漿顆粒

6、增粗明顯降低胚胎種植率(P＜0.05)，其它形態(tài)如極體、胞漿顏色、胞漿暈及胞漿內(nèi)空泡均不影響胚胎種植率。(2)胚胎體外培養(yǎng)至Day3時，胚胎發(fā)育速度、卵裂球核數(shù)量和碎片類型在植入組與未植入組之間有顯著性差異(P＜0.05)。植入組中7～8細胞組最多見(71.4％，40/56)，尤其是8細胞高達60.7％(34/56)，未植入組中7～8細胞僅為45.3％(29/64)。卵裂球核指標中，植入組至少一單核組最多見(57.1％)，其次為均一單核

7、組(30.4％)，未植入組僅為34.4％和12.5％。碎片類型中植入組T1出現(xiàn)率最高，為41.1％，未植入組僅為15.6％。卵裂球大小差異、胚胎碎片的多少在植入組與未植入組間比較無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。對Day3胚胎形態(tài)中上述五個指標進行判別分析，結(jié)果表明五個Day3胚胎形態(tài)評估指標中，Day3卵裂球數(shù)和碎片類型較卵裂球核、卵裂球大小差異、碎片多少是更為重要的指標，其胚胎植入判別符合率為70.0％。其它胚胎形態(tài)指標如卵裂球顏色及顆

8、粒、卵裂球內(nèi)空泡、透明帶厚度及形狀和胚胎種植之間均無統(tǒng)計學意義。(3)Day3聯(lián)合原核綜合評分對胚胎種植具有靈敏性(P＜0.05)，ROC曲線下面積0.640，在四個評分系統(tǒng)中最大，即綜合評分越高預測胚胎植入的可能性越大。根據(jù)此標準選擇移植的Day3胚胎臨床妊娠率為50.0％(83/166)，種植率為32.3％(123/381)。綜合評分中97～120分胚胎妊娠率高達60.6％，植入率為40.8％，將其定義為優(yōu)質(zhì)胚胎，72～96分為良好

9、胚胎，＜72分為低質(zhì)量胚胎。儼結(jié)論：(1)原核期胚胎形態(tài)可以反映受精卵的質(zhì)量，但與Day3胚胎質(zhì)量不完全一致，在IVF臨床工作中是選擇移植胚胎的一項輔助指標，能預測胚胎發(fā)育潛能。(2)在選擇移植胚胎時，胚胎生長速度及碎片類型是考慮的首要因素，Day3胚胎發(fā)育至8細胞是移植胚胎時的最佳選擇。選擇移植胚胎時，碎片類型較傳統(tǒng)所認為的碎片多少更為重要。(3)Day3胚胎聯(lián)合原核綜合評分對妊娠結(jié)局有很好的預測價值。該評分系統(tǒng)能預測胚胎的種植潛能，