CC型趨化因子與慢性蕁麻疹發(fā)病關(guān)系的探討以及特異性免疫治療的臨床和實(shí)驗(yàn)室研究.pdf

1、慢性蕁麻疹是指反復(fù)發(fā)作的、短暫的風(fēng)團(tuán)和瘙癢持續(xù)六周以上，其發(fā)病主要由Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)引起，即IgE與受體交聯(lián)所致的肥大細(xì)胞脫顆粒及過敏介質(zhì)的釋放，其中最重要的成分是組胺。近期的研究提出的遲發(fā)相變態(tài)反應(yīng)的概念認(rèn)為，除了組胺之外，趨化因子、嗜酸粒細(xì)胞、Th細(xì)胞及其細(xì)胞因子在慢性蕁麻疹的發(fā)病中也具有舉足輕重的地位。遲發(fā)相變態(tài)反應(yīng)的各種細(xì)胞和介質(zhì)在慢性蕁麻疹發(fā)病中的作用是目前的研究熱點(diǎn)，但是其中有關(guān)于趨化因子與慢性蕁麻疹發(fā)病的關(guān)系尚不完全明確。目前

2、，在治療慢性蕁麻疹時(shí)主要運(yùn)用組胺H1受體拮抗劑，除此之外，近幾年來特異性免疫治療(Specificimmunotherapy)也越來越多的被應(yīng)用于慢性蕁麻疹的治療。但是目前對(duì)特異性免疫治療在治療慢性蕁麻疹的療效方面的判定大多為臨床的觀察，缺乏臨床對(duì)照的研究，而且對(duì)于特異性免疫治療是否可以通過影響趨化因子的表達(dá)而發(fā)揮作用，目前也尚不明了。 本課題旨在研究CC型趨化因子家族中調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)、單

3、核細(xì)胞趨化蛋白-1，3(MCP-1，3)和巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)在慢性蕁麻疹患者中的表達(dá)情況及其與變態(tài)反應(yīng)中其他介質(zhì)的關(guān)系，探討CC型趨化因子在慢性蕁麻疹發(fā)病機(jī)制中的作用，從而為制定相應(yīng)的治療方案提供依據(jù)；同時(shí)初步探索了特異性免疫治療在治療頑固性的慢性蕁麻疹患者中的臨床療效和對(duì)RANTES及MCP-1表達(dá)水平的影響，旨在為慢性蕁麻疹的特異性免疫治療提供臨床和實(shí)驗(yàn)室的依據(jù)。 本研究的第一部分首先應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈

4、式反應(yīng)(RT-PCR)的方法檢測(cè)了31例慢性蕁麻疹患者和22例正常對(duì)照外周血單一核細(xì)胞中(PBMCs)RANTES、MCP-1、MCP-3和MIP-1α的mRNA表達(dá)水平，同時(shí)檢測(cè)了其中12例患者局部皮損處這四種CC型趨化因子mRNA的表達(dá)水平，并與11例正常對(duì)照比較；另外還分析了PBMCs中RANTES、MCP-1、MCP-3和MIP-1α的mRNA表達(dá)水平與血清IgE和ECP水平的相互關(guān)系，初步探討了與變態(tài)反應(yīng)密切相關(guān)的CC型趨化因

5、子在慢性蕁麻疹患者中的表達(dá)情況。在第二部分研究中，則首先采用皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)(Skinpricktest)對(duì)慢性蕁麻疹患者進(jìn)行了吸入性和食入性過敏原的檢測(cè)，并和慢性濕疹及正常對(duì)照比較，特別是比較這三者在粉塵螨陽性率方面的差異，隨后通過定量的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(quantitativesandwichenzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)的方法檢測(cè)粉塵螨點(diǎn)刺結(jié)果陽性的發(fā)作期、緩解期慢性蕁麻疹患者外周

6、血血清的RANTES和MCP-1的表達(dá)水，并與正常對(duì)照比較，從而進(jìn)一步探討CC型趨化因子與慢性蕁麻疹疾病活動(dòng)的關(guān)系及意義。在第三部分的研究中，將粉塵螨過敏的慢性蕁麻疹患者隨機(jī)分為兩組，一組接受粉塵螨特異性免疫治療，另一組不接受特異性免疫治療，兩組患者在發(fā)作期均給予咪唑斯汀口服治療(10mg/d)，癥狀緩解后即?？诜幬?，研究兩組在療效上的差異以及對(duì)RANETES和MCP-1的表達(dá)水平的影響的差異。 本課題第一部分的研究發(fā)現(xiàn)，慢性

7、蕁麻疹患者PBMCs中四種CC型趨化因子：RANTES、MCP-1、MCP-3、MIP-1α的mRNA表達(dá)顯著高于正常對(duì)照(P＜0．001)，其局部皮損中RANTES和MCP-1的表達(dá)也顯著高于正常對(duì)照(P＜0．001)，但MCP-3和MIP—1α在局部皮損中的表達(dá)與正常對(duì)照相比則無顯著差異(P＞0．05)。同時(shí)，相關(guān)性分析證實(shí)PBMCs中這四種CC型趨化因子的mRNA表達(dá)水平之間亦存在正相關(guān)(P＜0．05)，局部皮損中RANTES和M

8、CP-1的mRNA表達(dá)水平也呈正相關(guān)(P＜0．001)，但PBMCs和局部皮損中相對(duì)應(yīng)的趨化因子之間則沒有顯著相關(guān)性(P＞0．05)。另外，慢性蕁麻疹患者PBMCs中RANTES的mRNA表達(dá)水平與其血清總IgE和ECP的水平呈負(fù)相關(guān)(P＜0．05)；第二部分的研究結(jié)果顯示在慢性蕁麻疹患者中，過敏原的總陽性率為91．7％，顯著高于慢性濕疹患者的總陽性率75．0％和正常對(duì)照的總陽性率6．0％(P均＜0．001)，其中粉塵螨的陽性率在慢性蕁

9、麻疹患者中為58．3％，顯著高于濕疹患者的36．8％和正常對(duì)照的6．0％(P＜O．01和0．001)。粉塵螨皮試陽性的發(fā)作期慢性蕁麻疹患者血清中RANTES和MCP-1的蛋白表達(dá)水平均顯著高于緩解期患者和正常對(duì)照，而緩解期慢性蕁麻疹患者的RANTES和MCP-1的蛋白表達(dá)水平也顯著的高于正常對(duì)照(P均＜0．001)，同時(shí)相關(guān)性分析表明，發(fā)作期患者RANTES和MCP-1的蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)(P＜0．01)。第三部分的研究發(fā)現(xiàn)，與單用咪

10、唑斯汀的患者相比較，在運(yùn)用粉塵螨特異性免疫治療聯(lián)合咪唑斯汀治療慢性蕁麻疹患者后，特異性免疫治療組在治療后第16周末和第24周末的總有效率和癥狀積分下降指數(shù)(SSRI)均顯著高于對(duì)照組(P＜0．05和0．0001)。而且特異性免疫治療組在減少每周發(fā)作次數(shù)和減少每周抗組胺藥物用量方面的作用與對(duì)照組相比也更為明顯(P＜0．05和0．01)。兩組在24周的隨訪期中，不良事件的發(fā)生率均無顯著差異(P＞0．05)。在治療后第16周，特異性免疫治療在

11、更好的控制疾病的同時(shí)，對(duì)于RANTES和MCP-1蛋白水平的下調(diào)作用與對(duì)照組相比也更加明顯(P＜0．0001和0．01)，且與臨床起效的時(shí)間基本一致。 因此，在慢性蕁麻疹中，存在RANTES、MCP-1，3和MIP-1α的mRNA表達(dá)水平的異常。粉塵螨過敏是慢性蕁麻疹發(fā)病的一個(gè)明顯的誘因，在粉塵螨過敏的慢性蕁麻疹患者中，RANTES和MCP-1蛋白水平的異常表達(dá)在慢性蕁麻疹的發(fā)病中起到重要作用，而且與疾病的活動(dòng)密切相關(guān)。粉塵螨特