丁香抗氧化活性物質(zhì)提取及其抗LDL氧化修飾.pdf

1、實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)國(guó)家公布的87種藥食兩用原料測(cè)試發(fā)現(xiàn)，其中20種抗氧化活性較高。本實(shí)驗(yàn)對(duì)這20種原料進(jìn)行篩選發(fā)現(xiàn)，丁香水提液和乙醇提取液均表現(xiàn)最強(qiáng)的抗氧化活性。因此，選定丁香為本試驗(yàn)研究原料。
　　采用超聲-微波協(xié)同提取技術(shù)，通過(guò)單因素和正交試驗(yàn)對(duì)丁香抗氧化活性物質(zhì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并對(duì)該技術(shù)高效提取原因進(jìn)行分析。結(jié)果表明，超聲-微波協(xié)同提取最佳工藝條件為:50％乙醇、料液比1∶30(g∶mL)、超聲功率50W、微波功率100W及提取

2、時(shí)間12min。通過(guò)和水浴振蕩最優(yōu)提取工藝對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，超聲-微波協(xié)同技術(shù)的提取效率顯著高于水浴振蕩提取(P＜0.01);通過(guò)相互作用方式分析發(fā)現(xiàn)，協(xié)同提取優(yōu)勢(shì)在于將超聲和微波兩種能量同時(shí)協(xié)同作用，相互取長(zhǎng)於短;通過(guò)掃描電鏡分析殘?jiān)l(fā)現(xiàn)，協(xié)同提取對(duì)原料細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞更嚴(yán)重、作用更充分，從而增強(qiáng)了提取效率。
　　上述試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)丁香具有很強(qiáng)的抗氧化活性。本試驗(yàn)進(jìn)一步對(duì)丁香抗低密度脂蛋白(LDL)氧化修飾活性進(jìn)行了研究。采用生物活性追蹤法將

3、丁香提取物分成不同極性部位，通過(guò)硫酸銅體外誘導(dǎo)LDL氧化，以硫代巴比妥酸反應(yīng)物(TBARS)為指標(biāo)評(píng)價(jià)丁香抗LDL氧化修飾能力。結(jié)果表明，乙酸乙酯相為丁香抗LDL氧化修飾有效部位，其抑制率顯著性高于正丁醇相、水相和粗提物(P＜0.05)，比抑制率最低的水相高出63.02％;并發(fā)現(xiàn)丁香粗提物和乙酸乙酯有效部位的抑制率均呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系;同時(shí)乙酸乙酯有效部位對(duì)已氧化LDL具有延緩氧化作用。當(dāng)濃度為1.2mg/mL時(shí)，吸光度值(OD532)

4、在32h達(dá)到最大，比促氧化組延長(zhǎng)了18h。
　　通過(guò)薄層色譜和薄層掃描法對(duì)丁香乙酸乙酯有效部位進(jìn)行初步分析發(fā)現(xiàn)，丁香乙酸乙酯相中含量較高的組分主要有8種，對(duì)該相進(jìn)行酸水解分析發(fā)現(xiàn)，有效部位中主要有兩種苷元和三種糖苷，糖苷中的糖類主要由葡萄糖、鼠李糖和葡萄糖醛酸組成;進(jìn)一步采用柱層析對(duì)其有效部位進(jìn)行分離純化，分離得到10種弱極性單體化合物，通過(guò)波譜分析這10種物質(zhì)分別是齊墩果酸、槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚、沒(méi)食子酸、鞣花酸、鼠李素、