中藥連翹氯仿萃取物的活性物質(zhì)研究.pdf

1、連翹Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl為木犀科連翹屬植物連翹的果實，其同屬植物有10余種，但多數(shù)作為園林觀賞植物，作藥用者主要有連翹和金鐘花。具有清熱解毒，消腫散結(jié)等功效。
　　 本文綜合運用硅膠柱層析、ODS柱層析、Sephadex LH-20柱層析以及反相HPLC等多種色譜學分離手段，對連翹60％乙醇提取物的氯仿萃取物的化學成分進行了系統(tǒng)研究，從中分離得到化合物30個。通過理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜學手段(

2、UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR和2D-NMR)鑒定了它們的結(jié)構(gòu)，分別為：齊墩果酸(Oleanolic Acid)(1)，白樺脂酸(Betulinic)(2)，20(s)-Dammar-24-ene-3β-20-did-2-acetate(3)，3β-乙酰熊果酸(3β-O-acetylursolic acid)(4)，19-hydroxy-15，16-dinorlabd-8(17)-en-13-one(5)，4-[2-(5

3、-Hydroxymethyl-5，8a-dimethyl-2-methylene-decahydro-naphthalen-1-yl)-ethyl]-5H-furan-2-one(6)，(-)3β-hydroxy-15，16-dinorlabd-8(17)-ene-13-one(7)，5-(4-Carboxy-3-methyl-but-3-enyl)-1，4a-dimethyl-6-methylene-decahydro-naphtha

4、lene-1-carboxylic acid(8)，(Z)-5-((8aR)-6-hydroxy-5，5，8a-trimethyl-2-methylenedecahydronaphthalen-1-yl)-3-met-hylpent-2-enal(9)，(Z)-5-((5R，8aR)-5-(hydroxymethyl)-5，8a-dimethyl-2-methyl-ene-decahydronaphthalen-1-yl)3-methy

5、lpent-2-enoic acid(10)，(Z)-5-((8aR)-6-hydro-xy-5，5，8a-trimethyl-2-methylenedecahydronaphthalen-1-yl)-3-methylpent-2-enoic a-cid(11)，(+)-異落葉松樹脂醇[(+)-Isolariciresinol](12)，(+)-松脂素單甲基醚[(+)-Pionoresinol Monomethyl Ether](13)

6、，F(xiàn)orsythialan A(14)，(+)-落葉松脂素(+)-Lariciresinol(15)，(+)-連翹脂素[(+)-Phillygenin](16)，(-)-羅漢松脂素[(-)-Matairesinol](17)，(+)-表松脂素[(+)-Epipinoresinol](18)，8-Hydroxypin-oresinol(19)，5’-甲氧基落葉松脂素(5’-Methoxy Lariciresinol)(20)，Medior

7、esinol(21)，7’-epi-8-Hydroxypinoresinol(22)，(+)-松脂素[(+)-Pinoresinol](23)，(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)((3R，4S)-5-(3-hydroxy-5-methoxyphenyl)-4-methyltetrah-ydrofuran-3-yl)methanone(24)，(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)((3R，4S，5S)

8、-5-(3-h-ydroxy-5-methoxyphenyl)-4-methyltetrahydrofuran-3-yl)methanone(25)，4-Hydro-xy-4-(methylenecarbomethoxy)-cyclohexa-2，5-dienone(26)，乙基咖啡酸(ethylcaf-feate)(27)，methyl2-(1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2，5-dien-1-yl)acetate(

9、28)，連翹環(huán)己醇酮(Rengyolone)(29)，β-谷甾醇(β-sitosterol)(30)。30個化合物中包括三萜類化合物4個，二萜類化合物7個，木脂素類化合物14個，甾醇類化合物1個，苯丙素類化合物1個，其它類化合物3個。其中化合物9，24，25為新化合物，化合物4-8，10，11，20，21，26-28為首次從該屬植物中分離得到。
　　 動物實驗結(jié)果證明連翹氯仿層提取物對STZ誘導的Ⅰ型糖尿病小鼠具有一定的治療作用

10、。采用酶滴定法對連翹氯仿層中分離得到的各單體化合物的SHP2促進作用的能力進行了考察。結(jié)果表明，連翹氯仿層中分離得到的30個化合物中，6個化合物在不同的濃度下顯示不同程度促進SHP2活性的作用，其中活性化合物齊墩果酸是具有廣泛降糖報道的天然化合物。
　　 同時，本文還對分離得到化合物的抗腫瘤和抗老年癡呆方面的活性進行了初步探討。在抗腫瘤實驗中，用MTT法進行了單體化合物對不同細胞的細胞毒活性進行了檢測。并且用PARP切割的蛋白質(zhì)