從豬血中酶法制取血紅素的研究.pdf

1、血液是一種營養(yǎng)價(jià)值很高的動物性蛋白資源，可廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)中，來源十分豐富。血紅素是一類重要的天然卟啉鐵化合物，是血紅蛋白、肌紅蛋白和紅細(xì)胞的輔基(活性部位)，是動物血液中的天然色素，具有重要的生理功能和使用價(jià)值。 在血紅素的測定方法研究中，分光光度法是血紅素定量分析的傳統(tǒng)方法，操作簡單快速，成本低，適用于大批量樣品的測定。HPLC法分離效果好，可聯(lián)用其他儀器方法如質(zhì)譜法對物質(zhì)進(jìn)行檢測。但由于該方面的研究比較少，方法存在一定缺

2、陷。 以經(jīng)過預(yù)處理的血紅蛋白粉為原料，選用不同的蛋白酶分別進(jìn)行單一酶和復(fù)合酶水解血紅蛋白。結(jié)果表明堿性蛋白酶水解的效果最好。單因素實(shí)驗(yàn)和正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)確定最佳水解條件為：溫度60℃，pH值7.5，底物濃度5％，酶底比4％。此外，不同原料處理方式和復(fù)合酶水解對酶反應(yīng)沒有起到十分明顯的作用。采用離心的分離方法從血紅蛋白水解液中提取血紅素。水解液在30℃保溫，離心除去不溶性肽后，調(diào)節(jié)pH值4.0，再離心得產(chǎn)品。產(chǎn)品純度最低為24.47％

3、，得率為57.50％；與超濾分離所得產(chǎn)品(血紅素含量9.02％)比較，離心分離的效果好于超濾分離。 產(chǎn)品的性質(zhì)研究表明：產(chǎn)品2為無定形粉末狀，產(chǎn)品1呈黑褐色塊狀；每克產(chǎn)品1中含有血紅素0.1781g，每克產(chǎn)品2中含有血紅素0.2447g。紫外掃描圖譜和凝膠色譜圖表明，水解液中含有肽和血紅素，其中肽占主要部分：上清液中只有肽，血紅素已經(jīng)被除去。產(chǎn)品2中血紅素含量較高。液質(zhì)聯(lián)用可得產(chǎn)品2中主要物質(zhì)的分子量為616.7和657，認(rèn)為是