牡丹芍藥遠(yuǎn)緣雜交胚珠、胚培養(yǎng)及F1代種子萌發(fā)的研究.pdf

1、胚珠與胚培養(yǎng)是影響牡丹遠(yuǎn)緣雜交育種的重要技術(shù)。本文以芍藥品種‘粉玉奴‘(Paeonia lactifloia‘Fenyunu’)，牡丹品種‘鳳丹白’（Paeoma suffruticosa‘Fengdanbai’）為親本，分別進(jìn)行正、反遠(yuǎn)緣雜交。通過測定貯藏的親本花粉的活力，將雜交親本花粉貯藏過程中的活力變化進(jìn)行比較;對正、反交結(jié)實(shí)率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，確定了最佳雜交方式;通過對敗育前的正、反交胚珠與胚進(jìn)行培養(yǎng)，研究了不同胚齡及不同培養(yǎng)基對其生

2、長的影響;研究了沙藏和不同GA3處理對促進(jìn)F1代種子萌發(fā)及成苗的影響。研究結(jié)果如下:
　　1.在貯藏一年的條件下，‘鳳丹白’與‘粉玉奴’花粉活力均隨著時(shí)間的增加而呈逐漸下降趨勢，‘粉玉奴’花粉活力比‘鳳丹白’低10.5％，但在授粉第1d達(dá)到58.6％。這說明了即使在牡丹芍藥花期不遇的情況下，也可使用貯藏的芍藥花粉進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交。
　　2.提高雜交結(jié)實(shí)率對于牡丹雜交育種有極其重要的意義，雜交組合是影響結(jié)實(shí)率的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)中，正交

3、所得雜交種結(jié)實(shí)率僅為7％，而反交雜交種結(jié)實(shí)率高達(dá)100％，鳳丹白♀×粉玉奴♂（反交）的結(jié)實(shí)率明顯高于粉玉奴♀×鳳丹白♂（正交），這可能是與‘鳳丹白’的生長勢、結(jié)實(shí)力強(qiáng)有一定的關(guān)系。
　　3.胚珠離體培養(yǎng)的初階研究表明:胚珠的胚齡明顯影響離體培養(yǎng)效果，發(fā)育初期（≤15d）的胚珠培養(yǎng)不成功。齡期9d，10d的正交胚珠膨大率較高，存活時(shí)間相對較長;齡期11d、12d、13d的反交胚珠在初期培養(yǎng)過程中生長迅速，培養(yǎng)60d時(shí)全部轉(zhuǎn)綠且膨大率

4、相對較高，但均在培養(yǎng)60d后逐漸停止生長并相繼死亡。對正交胚珠初代培養(yǎng)45d后發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+3％蔗糖上的胚珠生長的各項(xiàng)指標(biāo)相對較好;反交胚珠初代培養(yǎng)60d后發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基MS+NAA0.5mg/L+IBA1.0mg/L+3％蔗糖上的胚珠生長的各項(xiàng)指標(biāo)相對較高。在繼代培養(yǎng)中，無論是正交還是反交胚珠，都在培養(yǎng)80d后開始停止生長并逐漸死亡。
　　4.胚培養(yǎng)結(jié)果表明:培養(yǎng)基種類不同，對胚的誘

5、導(dǎo)分化也有所不同。以MS為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度的6-BA，NAA，對雜交種胚正常生長的初代培養(yǎng)基進(jìn)行了篩選后，認(rèn)為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+3％蔗糖上胚的膨大率，抽芽率及整齊度相對較高，是較好的初代培養(yǎng)基。將初代培養(yǎng)基上的幼苗轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基上，30d后統(tǒng)計(jì)各項(xiàng)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，各項(xiàng)指標(biāo)最優(yōu)的配比為MS+IBA02mg/L+GA30.2mg/L+6-BA0.2mg/L+3％蔗糖，其次為MS+IBA0.1mg/L+G

6、A30.3mg/L+6-BA0.2mg/L+3％蔗糖。本試驗(yàn)在生根培養(yǎng)30d后發(fā)現(xiàn)，MS+IBA03mg/L+NAA0.2mg/L+3％蔗糖的培養(yǎng)效果較好，根狀突起較多，根數(shù)及根長都相對較高。
　　5.F1代雜交種子萌發(fā)結(jié)果表明:沙藏和GA3處理可提前雜交種子的萌發(fā)根時(shí)期，且發(fā)根率和主根長≥3cm的百分率均較高。其中，處理2(300mg/L GA3)可獲得最高生根率(88.75％)和主根長≥3cm百分率(2208％)。適宜的根長對