大蒜素減低幽門(mén)螺桿菌對(duì)胃上皮細(xì)胞間隙連接通訊功能抑制的研究.pdf

1、目的：觀(guān)察體外實(shí)驗(yàn)中幽門(mén)螺桿菌(H.pylori)及大蒜素干預(yù)對(duì)胃上皮細(xì)胞系MGC-803細(xì)胞Cx37、Cx43mRNA表達(dá)和細(xì)胞間隙連接通訊功能(GJIC)的影響，明確大蒜素能否減低H.pylori對(duì)胃上皮細(xì)胞GJIC功能的抑制。 方法：胃上皮細(xì)胞系MGC-803細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)夜貼壁后，按以下實(shí)驗(yàn)分組：①對(duì)照組：不加H.pylori或大蒜素，培養(yǎng)24、48及72h；②大蒜素組：加入大蒜素至終濃度分別為3gg/ml、6μg/ml

2、、9μg/ml、12pg/ml，培養(yǎng)24、48及72h；③H.pylori組：按細(xì)菌/細(xì)胞100:1加入H.pylori國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)毒力菌株NCTCJ99(CagA+、VacA+)，培養(yǎng)24h；④先加大蒜素后加H.pylori組：加入大蒜素至終濃度為12ug/ml培養(yǎng)24h后，加NCTCJ99培養(yǎng)24h；⑤先加H.pylori后加大蒜素組：加NCTCJ99培養(yǎng)24h后，加大蒜素至終濃度為12μg/ml培養(yǎng)24h。用RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞Cx

3、37、Cx43mRNA表達(dá)，劃痕標(biāo)記染料示蹤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞間隙連接通訊功能，紙片擴(kuò)散法觀(guān)察抑菌環(huán)直徑，MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖。 結(jié)果: (1)對(duì)照組：Cx37mRNA有表達(dá)，Cx43mRNA無(wú)表達(dá)，GJIC功能弱。(2)大蒜素組：Cx37mRNA表達(dá)較對(duì)照組升高(P<0.01)；隨大蒜素濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)，Cx37mRNA表達(dá)逐漸升高，各組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，Cx43mRNA仍無(wú)表達(dá)；細(xì)胞間隙連接通訊功能改善。

4、(3)H.pylori組：Cx37mRNA表達(dá)較對(duì)照組降低(P<0.01)，Cx43mRNA仍無(wú)表達(dá)。(4)先加大蒜素后加H.pylori組和先加H.pylori后加大蒜素組：兩組間Cx37mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但均較H.pylori組升高(P<0.01)，且GJIC功能改善。(5)大蒜素對(duì)H.pylori的抑菌環(huán)直徑均大于7mm，平均為13±3.49mm。(6)大蒜素對(duì)MGC-803細(xì)胞增殖有抑制作用，呈劑量時(shí)