免疫性血管炎幼兔模型中血清8-異前列腺素F-,2α-的變化及N-乙酰半胱氨酸的干預(yù)研究.pdf

1、目的：觀察川崎病(kawasaki disease,KD)幼兔免疫性血管炎動(dòng)物模型中急性期和恢復(fù)期血清8-異前列腺素F2α(8-iso-prostaglandinF2α,8-iso-PGF2α)的水平、血小板(PLT)數(shù)量變化,以及抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(NAC)干預(yù)對(duì)上述指標(biāo)的影響,結(jié)合病理改變探討8-iso-PGF2α與KD血管炎性損害的關(guān)系,以及NAC對(duì)血管炎的保護(hù)作用。
　　 方法：取75只剛斷奶的日本大耳幼年家兔(幼

2、兔),周齡3～4周,體重(698.94±47.33)g,隨機(jī)分為:模型組、NAC組及對(duì)照組,每組25只。模型組于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始第1天和第14天予10％牛血清白蛋白2.5ml/kg靜脈緩慢推注,誘發(fā)免疫性血管炎,第18天開(kāi)始每天予生理鹽水15ml/kg灌胃干預(yù)4周；NAC組實(shí)驗(yàn)開(kāi)始第1天和第14天予10％牛血清白蛋白2.5 ml/kg靜脈緩慢推注,誘發(fā)免疫性血管炎,第18天開(kāi)始每天予1％NAC溶液15ml/kg(相當(dāng)于NAC150mg/kg.d

3、)灌胃干預(yù)4周；對(duì)照組于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始第1天和第14天予生理鹽水2.5ml/kg靜脈緩慢推注,第18天開(kāi)始每天予生理鹽水15ml/kg灌胃干預(yù)4周。干預(yù)后第7天(急性期)和第28天(恢復(fù)期)采血,用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清8-iso-PGF2α的濃度；用ADVIA2120型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板數(shù)量。同時(shí)于干預(yù)前一天(即實(shí)驗(yàn)第17天)各組隨機(jī)取幼兔5只處死,干預(yù)后第7天各組隨機(jī)取幼兔10只,干預(yù)后第28天取余下幼兔處

4、死,取心臟組織行HE染色和Masson染色,光鏡下觀察血管的病理學(xué)改變。用計(jì)算機(jī)彩色病理圖文分析系統(tǒng)對(duì)膠原纖維陽(yáng)性面積占血管壁面積的百分比進(jìn)行分析處理。
　　 結(jié)果：⑴干預(yù)前一天(即第17天):模型組和NAC組可見(jiàn)小冠狀動(dòng)脈明顯淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)等改變,中冠狀動(dòng)脈出現(xiàn)輕度炎性損害,血管外膜水腫。干預(yù)后第7天(急性期):模型組心臟組織可見(jiàn)小冠狀動(dòng)脈淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)減輕,而中冠狀動(dòng)脈炎性損傷改變加重,表現(xiàn)為血管壁水腫、內(nèi)皮細(xì)胞壞死脫落、內(nèi)皮下

5、組織水腫、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)并出現(xiàn)血栓形成；NAC組較模型組冠狀動(dòng)脈病理?yè)p害明顯減輕；兩組中冠狀動(dòng)脈病理?yè)p害比較秩和檢驗(yàn)平均秩次分別為39.65和21.35,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。干預(yù)后第28天(恢復(fù)期):兩組血管炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)消退,模型組血管壁可見(jiàn)不同程度的纖維增生；模型組和NAC組膠原纖維陽(yáng)性面積占血管壁面積的百分比均數(shù)分別為:(21.43±4.28)％、(9.30±3.11)％,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。對(duì)照組冠狀動(dòng)脈

6、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中均未見(jiàn)明顯病理?yè)p害。⑵血清8-iso-PGF2α水平檢測(cè):干預(yù)后第7天(急性期)對(duì)照組、模型組和NAC組血清8-iso-PGF2α水平分別為(402.22±60.32)pg/ml、(804.61±76.72)pg/ml、(525.87±64.62)pg/ml。模型組血清8-iso-PGF2α水平較對(duì)照組顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；NAC組血清8-iso-PGF2α水平較模型組明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.

7、05)；NAC組血清8-iso-PGF2α水平較對(duì)照組仍有增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。干預(yù)后第28天(恢復(fù)期)對(duì)照組、模型組和NAC組血清8-iso-PGF2α水平分別為(403.96±68.09)pg/ml、(524.87α71.88)pg/ml、(420.48±75.00)pg/ml。模型組血清8-iso-PGF2α水平較對(duì)照組仍有增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；NAC組血清8-iso-PGF2α水平仍低于模型組

8、,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；NAC組與對(duì)照組血清8-iso-PGF2α含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。模型組干預(yù)后第28天(恢復(fù)期)血清8-iso-PGF2α水平較干預(yù)后第7天(急性期)降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑶血小板數(shù)量檢測(cè):干預(yù)后第7天(急性期)對(duì)照組、模型組和NAC組血小板數(shù)量分別為(504.20±55.51)×109/L、(893.30±92.71)×109/L、(558.00±76.65)×109/L

9、。模型組血小板數(shù)量較對(duì)照組顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；NAC組血小板數(shù)量較模型組明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；NAC組血小板數(shù)量較對(duì)照組仍有增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。干預(yù)后第28天(恢復(fù)期)對(duì)照組、模型組和NAC組血小板數(shù)量分別為(501.40±54.85)×109/L、(512.10±63.92)×109/L、(504.90±63.25)×109/L。各組血小板數(shù)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05

10、)。⑷各組干預(yù)后第7天血清8-iso-PGF2α水平和血小板數(shù)量呈正相關(guān)(r=0.766,P＜0.01)；各組干預(yù)后第28天血清8-iso-PGF2α水平和血小板數(shù)量無(wú)明顯相關(guān)(r=0.261,P＞0.05)。
　　 結(jié)論：①在KD幼兔免疫性血管炎的急性期和恢復(fù)期血清8-iso-PGF2α水平均有增高,且恢復(fù)期血清8-iso-PGF2α水平低于急性期8-iso-PGF2α水平。②抗氧化劑NAC能降低KD免疫性血管炎幼兔模型中8-