血糖和血糖波動(dòng)對(duì)抵抗素的表達(dá)和血8-異前列腺素F2α水平的影響.pdf

1、研究目的: 1．探討高血糖及血糖波動(dòng)對(duì)人血清resistin水平和PBMNC中resistin的mRNA表達(dá)的影響； 2．探討高血糖及血糖波動(dòng)對(duì)機(jī)體氧化應(yīng)激的影響。 研究內(nèi)容: 1．觀察不同糖耐量人群OGTT試驗(yàn)0min和60min時(shí)的血清resistin水平、PBMNC中resistin的mRNA表達(dá)水平以及血清中8-iso-PGF2α水平的差異； 2．觀察血糖波動(dòng)與血清resistin水平、外

2、周血單個(gè)核細(xì)胞中resistin的mRNA表達(dá)水平以及血清中8-iso-PGF2α水平的相關(guān)關(guān)系。 3．分析慢性高血糖指標(biāo)HbAlc與血清resistin水平、PBMNC中resistin的mRNA表達(dá)水平以及血清中8-iso-PGF2α水平的相關(guān)關(guān)系。 對(duì)象與方法: 1、研究對(duì)象 來自中山大學(xué)附屬第二醫(yī)院內(nèi)分泌科門診和體檢中心，根據(jù)1999年WHO糖尿病診斷和分型標(biāo)準(zhǔn)，入選新發(fā)T2DM患者(T2DM組)

3、21例；糖調(diào)節(jié)異?；颊?IGR)13例；體檢健康者選擇15名作為正常對(duì)照組(NGT組)。 2、研究方法 2．1人體參數(shù)的測(cè)定： 所有研究對(duì)象測(cè)量身高(Ht)、體重(Wt)、腰圍(W)、臀圍(H)、收縮壓、舒張壓，計(jì)算體重指數(shù)(BMI)和腰臀比(WHR)。 2．2 口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)和胰島素釋放試驗(yàn)所有研究對(duì)象進(jìn)行OGTT試驗(yàn)，試驗(yàn)當(dāng)天空腹于上午8時(shí)到內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)室，抽取空腹血樣測(cè)定血糖、胰島素

4、、血脂及肝腎功能。將82.5克含1分子水的葡萄糖粉溶于250～300mL水中，5分鐘內(nèi)喝完。從喝第一口糖水開始計(jì)時(shí)，分別于30min、60min、120 min抽血測(cè)定血糖和胰島素。在0min和60min采血測(cè)定血清8-iso-PGF2a和resistin水平，同時(shí)在0min和60min采血測(cè)定PBMNC中resistin的mRNA水平。 2．3 生化指標(biāo)的測(cè)定血脂質(zhì)、肝腎功能和四點(diǎn)血糖由本院檢驗(yàn)科測(cè)定。糖基化血紅蛋白(HbAl

5、c)和四點(diǎn)胰島素由本院內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)室測(cè)定。 2. 4 血清8-iso-PGF2α和resistin水平的測(cè)定0和60min分別取靜脈血2mL，1小時(shí)內(nèi)離心分離血清，-70℃冰箱保存。血清8-iso-PGF2α采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)同批測(cè)定。 2. 5 PBMNC中的resistin的mRNA含量測(cè)定0和60min分別取EDTA抗凝靜脈血4mL，1小時(shí)內(nèi)提取PBMNC，標(biāo)本-80℃冰箱保存。進(jìn)行RNA提取和逆轉(zhuǎn)錄，

6、同批進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定mRNA含量，以GAPDH為內(nèi)參，用Resistin的cDNA值/GAPDH的cDNA值的比值對(duì)PBMNC中resistin的mRNA的含量進(jìn)行校正，最后得到的是resistin的mRNA相對(duì)定量。 3、統(tǒng)計(jì)分析 所有計(jì)量資料均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，正態(tài)分布數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，非正態(tài)數(shù)據(jù)用中位數(shù)表示，并進(jìn)行l(wèi)g對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后再進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。三組間比較采用單因素方差分析，組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，相關(guān)分析

7、用Pearson法，顯著性水準(zhǔn)為0.05。統(tǒng)計(jì)軟件采用SAS 8.0系統(tǒng)。 結(jié)果: 1.臨床特征三組研究對(duì)象的性別構(gòu)成、年齡、BMI、腰圍、腰臀比以及血脂中的總膽固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇的比較均無明顯差異(P>0.05)，顯示三組之間具有較好的可比性。 2.各組組間血清Resistin水平的比較NGT、IGR及T2DM三組之間0min和60min時(shí)血清resistin水平均無差別，P

8、>0.05。 3.各組組間間PBMNC中resistin的mRNA水平的比較比較三組之間PBMNC中resistin的mRNA水平，結(jié)果顯示0min時(shí)三組resistin的mRNA的水平分別為：0.061(0.005-1.98)vs 0.081(0.007-43.7)vs0.038(0.007-8.60)，P<0.05。 4.各組組間血清8-iso-PGF2α水平的比較比較三組之間血清8-iso-PGF2α水平，結(jié)果顯示

9、0min時(shí)三組血清8-iso-PGF2α的水平分別為6123(137-9125)vs 9063(7938-10875)vs 7875(118.1-13160)，P<0.05，另外兩兩組間比較顯示IGR組高于NGT組，P<0.05；60min時(shí)三組血清8-iso-PGF2α的水平分別為：4938(156.3-91 56)vs 9250.5(7407-10050)vs8749(125.63-13610)，P>0.05，另外兩兩組間比較顯示I

10、GR組高于NGT組，P<0.05。 5.各組組內(nèi)血清resistin水平變化的比較比較了三組組內(nèi)血清resistin水平的變化，結(jié)果顯示與0min相比IGR組和T2DM組在60min時(shí)血清中resistin水平均有升高(P<0.05)，分別為IGR組： 6.71(1.4-24.09)to 13.95(5.10-21.94)，T2DM組： 8.3(3.30-30.10)to13.95(4.48-48.15)，NGT組：7.

11、15(3.25-12.25)to 7.40(2.50-22.70)，升高不明顯(P>0.05)。 6.各組組內(nèi)PBMNC中resistin的mRNA水平變化的比較比較了三組組內(nèi)PBMNC中resistin的mRNA水平的變化，結(jié)果顯示與0min相比IGR組和T2DM組在60min時(shí)Resistin的mRNA水平均有升高(P<0.05)，分別為IGR組：0.081(0.007-43.7)to 0.18(0.02-23.8)，T2DM組：0

12、.038(0.007-8.60)to 0.06(0.014-10.50)；NGT組：0.061(0.005-1.98)to 0.065(0.004-12.00)，升高不明顯(P>0.05)。 7.各組組內(nèi)8-iso-PGF2α水平變化的比較比較了三組組內(nèi)血清8-iso-PGF2α水平的變化，結(jié)果顯示與0min相比NGT組和T2DM組在60min時(shí)血清中8-iso-PGF2α水平有升高(P<0.05)，分別為NGT組：6123(1

13、37-9125)to 4938(156.3-9156)，T2DM組：7875(118.1-13160)to 8749(125.63-13610)；IGR組：9063(7938-10875)to 9250.5(7407-10050)，升高不明顯(P>0.05)。 8.HbAlc與resistin水平的相關(guān)性分析三組組內(nèi)慢性高血糖指標(biāo)HbAlc與血清resistin水平無明顯相關(guān)性，各組r和P值分別為：NGT r=0.41，P=0.

14、13；IGR r=-0.13，P=0.67；T2DM r=-0.24，P=0.30；與PBMNC中resistin的mRNA水平也無明顯相關(guān)性，各組r和P值分別為：NGTr=0.14，P=0.63；IGR r=-0.03，P=0.92；T2DM r=0.10，P=0.67。 9.HbAlc與血清8-iso-PGF2α水平的相關(guān)分析三組組內(nèi)慢性高血糖指標(biāo)HbAlc與血清8-iso.PGF2a水平無明顯相關(guān)性，各組r和P值分別為：N

15、GT組r=0.37，P=0.17；IGR組r=0.20，P=0.50；T2DM組r=-0.22，P=0.34。 10.血糖波動(dòng)值(△G)與血清resistin水平變化值(△Resistin)的相關(guān)分析分析三組組內(nèi)血糖波動(dòng)(△G)和血清resistin水平的變化(△Resistin)關(guān)系，結(jié)果顯示IGR和T2DM組的△G和△Resistin呈正相關(guān)，r和P值分別為：IGR組：r=0.60，P=0.03，T2DM組：r=0.49，P

16、=0.03；NGT組△G和△Resistin無明顯相關(guān)(P>0.05)。 11.血糖波動(dòng)值(△G)和PBMNC中resistin的mRNA水平變化(△mRNA)的相關(guān)分析分析三組組內(nèi)△G和△mRNA的關(guān)系，結(jié)果顯示IGR和T2DM組的△G和△Resistin呈正相關(guān)，r和P值分別為：IGR組：r=0.56，P=0.04，T2DM組：r=0.53，P=0.01；NGT組△G和△Resistin無明顯相關(guān)(P>0.05)。

17、12.血糖波動(dòng)值(△G)與血清8-iso-PGF2α水平變化值(△8-iso-PGF2α)的相關(guān)分析分析三組組內(nèi)△G和△8-iso-PGF2α的關(guān)系，結(jié)果顯示IGR和T2DM組的△G和△8-iso-PGF2α呈正相關(guān)，r和P值分別為：IGR組：r=0.59，P=0.04，T2DM組r=0.51，P=0.02；NGT組△G和△8-iso-PGF2α無明顯相關(guān)(P>0.05)。 結(jié)論: 1.急性血糖升高增加IGR和T2DM患