G蛋白偶聯(lián)受體48參與脂肪分化調(diào)節(jié).pdf

1、肥胖實(shí)質(zhì)上是脂肪細(xì)胞數(shù)目的增多和脂肪細(xì)胞肥大的狀態(tài)，脂肪細(xì)胞數(shù)目增多是指由脂肪前體細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化增加，而脂肪細(xì)胞肥大是指脂肪細(xì)胞內(nèi)甘油三酯的積聚。本研究聚焦G蛋白耦聯(lián)受體超家族新成員G蛋白偶聯(lián)受體48(GProtein-CoupledReceptor，Gpr48)在脂肪分化中的作用以及其參與脂肪分化的機(jī)制。
　　首先，我們發(fā)現(xiàn)從胚胎發(fā)育后期脂肪開始發(fā)育階段到成年，Gpr48-/-小鼠都存在明顯的脂肪量減少，同時(shí)伴隨成熟脂肪

2、細(xì)胞分子標(biāo)記過氧化物酶增殖物激活受體γ2(PPARγ2)、脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白2(aP2)的表達(dá)下調(diào);接著我們在體外實(shí)驗(yàn)中證明，Gpr48SiRNA干擾的前脂肪細(xì)胞3T3-L1和Gpr48-/-的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEFGpr48-/-)不能進(jìn)行良好的脂肪誘導(dǎo)分化，同時(shí)，不僅成熟脂肪細(xì)胞分子標(biāo)記下調(diào)，調(diào)控脂肪分化的關(guān)鍵分子PPARγ2和CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)表達(dá)也明顯下調(diào);而在3T3-L1過表達(dá)激活型Gpr48則

3、明顯增強(qiáng)該前脂肪細(xì)胞的脂肪分化能力，在MEFGpr484-/-過表達(dá)激活型Gpr48則恢復(fù)了MEFGpr48-/-脂肪分化能力。
　　以上實(shí)驗(yàn)表明Gpr48是參與調(diào)控脂肪分化的重要分子。我們還對Gpr48參與調(diào)控脂肪分化的機(jī)制進(jìn)行了研究。脂肪分化是受一系列分子級(jí)聯(lián)調(diào)控的過程，前脂肪細(xì)胞先經(jīng)過兩輪克隆增殖后再分化為成熟脂肪細(xì)胞，PPARγ2和C/EBPα是調(diào)節(jié)脂肪分化的關(guān)鍵分子，其受其他分子的調(diào)節(jié)，又能直接參與眾多成熟脂肪細(xì)胞脂肪代

4、謝酶的表達(dá)。
　　Gpr48并未影響MEF體外誘導(dǎo)分化過程中的克隆增殖過程，且Gpr48的表達(dá)先于PPARγ2，C/EBPα。進(jìn)一步研究表明MEFGpr484-/-在體外誘導(dǎo)分化前后都存在明顯的cAMP反應(yīng)原件結(jié)合蛋白(CREB)磷酸化水平下調(diào)，而pCREB可以調(diào)控PPARγ2，C/EBPα的表達(dá)，這種調(diào)控是直接結(jié)合于PPARγ2，C/EBPα的啟動(dòng)子區(qū)并促進(jìn)PPARγ2，C/EBPα的轉(zhuǎn)錄，而Gpr48敲除則明顯下調(diào)了PPARγ

5、2，C/EBPα啟動(dòng)子區(qū)CREB的磷酸化。Gpr48作為G蛋白耦聯(lián)受體通過cAMP和蛋白激酶A(PKA)信號(hào)通路發(fā)揮作用已有文獻(xiàn)證實(shí)，我們將cAMP類似物DB-CAMP加入接受脂肪誘導(dǎo)分化的MEFGpr48-/-，結(jié)果不僅發(fā)現(xiàn)CREB磷酸化水平得以恢復(fù)，且PPARγ2，C/EBPα啟動(dòng)子區(qū)的pCREB也恢復(fù)到對照MEFGpr48+/+水平，該MEFGpr48-/-也恢復(fù)了脂肪分化能力。
　　由此，我們認(rèn)為Gpr48是參與脂肪分化調(diào)