鮑曼不動桿菌耐藥分析及其intI1在生物被膜中作用機制探討.pdf

1、目的：了解長沙地區(qū)鮑曼不動桿菌的耐藥現(xiàn)狀，為臨床治療鮑曼不動桿菌感染提供指導(dǎo)；探討鮑曼不動桿菌Ⅰ類整合子的分布以及Ⅰ類整合酶基因在生物被膜與液態(tài)培養(yǎng)下的表達，為研究鮑曼不動桿菌整合子在其生物被膜中的耐藥機制奠定基礎(chǔ)。 方法： ①收集鮑曼不動桿菌臨床菌株并進行紙片擴散法藥敏實驗。 ②對收集的菌株進行基因擴增篩選出攜帶Ⅰ類整合酶的菌株，并檢測分析Ⅰ類整合子系統(tǒng)插入相關(guān)耐藥基因盒情況。 ③培養(yǎng)觀察形成生物被膜的

2、菌株并對生物被膜形成能力進行分析。 ④通過RT-PCR半定量方法分析Ⅰ類整合酶基因在生物被膜生長狀態(tài)以及普通液相培養(yǎng)狀態(tài)下的表達情況。 結(jié)果： ①Ⅰ類整合子相關(guān)基因盒陽性菌株對8種抗菌藥物耐藥率依次為氨芐西林/舒巴坦56％、亞胺培南33％、美洛西林100％、妥布霉素100％、四環(huán)素100％、復(fù)方新諾明100％、環(huán)丙沙星100％和頭胞他啶100％，并且Ⅰ類整合子相關(guān)基因盒陽性菌株對環(huán)丙沙星等7種抗生素耐藥率均顯著高

3、于Ⅰ類整合子相關(guān)基因盒陰性菌株(經(jīng)X2檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義)。 ②64株臨床菌株攜帶Ⅰ類整合酶的有46株，相關(guān)基因盒陽性的Ⅰ類整合子為9株。9株Ⅰ類整合子相關(guān)基因盒的擴增產(chǎn)物集中在1500bp至3000bp之間。 ③46株鮑曼不動桿菌中有42株能夠形成生物被膜。 ④生物被膜狀態(tài)下的鮑曼不動桿菌Ⅰ類整合酶基因表達增高。在普通液態(tài)培養(yǎng)組一類整合酶基因表達量為0.973±0.754，而在生物被膜狀態(tài)組一類整合酶基因表