鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥分析及其intI1在生物被膜中作用機(jī)制探討.pdf

1、目的：了解長(zhǎng)沙地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥現(xiàn)狀，為臨床治療鮑曼不動(dòng)桿菌感染提供指導(dǎo)；探討鮑曼不動(dòng)桿菌Ⅰ類整合子的分布以及Ⅰ類整合酶基因在生物被膜與液態(tài)培養(yǎng)下的表達(dá)，為研究鮑曼不動(dòng)桿菌整合子在其生物被膜中的耐藥機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 方法： ①收集鮑曼不動(dòng)桿菌臨床菌株并進(jìn)行紙片擴(kuò)散法藥敏實(shí)驗(yàn)。 ②對(duì)收集的菌株進(jìn)行基因擴(kuò)增篩選出攜帶Ⅰ類整合酶的菌株，并檢測(cè)分析Ⅰ類整合子系統(tǒng)插入相關(guān)耐藥基因盒情況。 ③培養(yǎng)觀察形成生物被膜的

2、菌株并對(duì)生物被膜形成能力進(jìn)行分析。 ④通過(guò)RT-PCR半定量方法分析Ⅰ類整合酶基因在生物被膜生長(zhǎng)狀態(tài)以及普通液相培養(yǎng)狀態(tài)下的表達(dá)情況。 結(jié)果： ①Ⅰ類整合子相關(guān)基因盒陽(yáng)性菌株對(duì)8種抗菌藥物耐藥率依次為氨芐西林/舒巴坦56％、亞胺培南33％、美洛西林100％、妥布霉素100％、四環(huán)素100％、復(fù)方新諾明100％、環(huán)丙沙星100％和頭胞他啶100％，并且Ⅰ類整合子相關(guān)基因盒陽(yáng)性菌株對(duì)環(huán)丙沙星等7種抗生素耐藥率均顯著高

3、于Ⅰ類整合子相關(guān)基因盒陰性菌株(經(jīng)X2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)。 ②64株臨床菌株攜帶Ⅰ類整合酶的有46株，相關(guān)基因盒陽(yáng)性的Ⅰ類整合子為9株。9株Ⅰ類整合子相關(guān)基因盒的擴(kuò)增產(chǎn)物集中在1500bp至3000bp之間。 ③46株鮑曼不動(dòng)桿菌中有42株能夠形成生物被膜。 ④生物被膜狀態(tài)下的鮑曼不動(dòng)桿菌Ⅰ類整合酶基因表達(dá)增高。在普通液態(tài)培養(yǎng)組一類整合酶基因表達(dá)量為0.973±0.754，而在生物被膜狀態(tài)組一類整合酶基因表