多重耐藥鮑曼不動桿菌關(guān)鍵耐藥基因的研究.pdf

1、目的：了解皖北地區(qū)3家教學醫(yī)院臨床分離的多重耐藥鮑曼不動桿菌的耐藥情況，探討其關(guān)鍵耐藥分子機制：β-內(nèi)酰胺水解酶及主動外排機制，為臨床抗菌藥物治療提供合理的指導和參考。
　　方法：收集皖北地區(qū)3家教學醫(yī)院2010年3月至2012年3月多重耐藥鮑曼不動桿菌無重復分離株共43株，采用全自動細菌鑒定與藥敏分析儀對收集菌株進行種屬鑒定并測定其對15種抗菌藥物的敏感性，采用PCR方法對關(guān)鍵的β-內(nèi)酰胺酶基因（包括TEM、IMP、VIM、OX

2、A-23、ISAba1-OXA-23）和外排泵基因AdeB進行了篩選，并對擴增產(chǎn)物進行測序分析；采用逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）檢測AdeB基因的mRNA表達水平，分析其表達與細菌耐藥性之間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1.43株非重復鮑曼不動桿菌病室來源以重癥監(jiān)護室最多（26株），其余為呼吸內(nèi)科（5株）、神經(jīng)外科（3株）、神經(jīng)內(nèi)科（2株）、燒傷整形科（2株），剩余5株來源于其他科室。標本來源分布情況：36株（83.7％）來源于

3、痰液，4株來源于分泌物，其余3株分別來源于血液、腦脊液和尿液。
　　2.15種抗菌藥物中，臨床常用藥物（阿米卡星、環(huán)丙沙星、慶大霉素、頭孢曲松、左氧氟沙星等）的耐藥率均達到95%以上，碳青霉烯類抗生素（亞胺培南、美羅培南）有較高的耐藥率，均為81.4%，頭孢哌酮舒巴坦耐藥率為69.8%，多粘菌素E耐藥率為7.0%，替加環(huán)素為4.7%，利福平為16.3%。
　　3.耐藥基因檢測：43株多耐藥鮑曼不動桿菌中TEM陽性株數(shù)41株，

4、陽性率95.3%；35株碳青霉烯耐藥鮑曼不動桿菌中IMP、VIM、OXA-23、ISAba1-OXA-23的陽性株數(shù)分別為20株、1株、29株、25株，陽性率分別為57.1%、2.9％、82.9%、71.4%，29株OXA-23基因中25株上游檢測到插入序列ISAba1，ISAba1-OXA-23經(jīng)測序比對，與Genbank上的該序列同源性為100%。
　　4.外排基因AdeB基因檢測均為陽性，逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）方法檢測

5、AdeB基因表達水平結(jié)果：碳青霉烯耐藥組和碳青霉烯相對敏感組菌株AdeB/GAPDH計算結(jié)果分別為（2.13±0.35）和（0.92±0.16），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。碳青霉烯類抗生素耐藥組的AdeB基因mRNA水平高于相對敏感組（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.皖北地區(qū)3家教學醫(yī)院的臨床分離的鮑曼不動桿菌耐藥情況較為嚴重，是值得關(guān)注的醫(yī)院感染病原菌，其中以ICU臨床分離率最高，呼吸系統(tǒng)感染更為常見。本地不

6、動桿菌對多粘菌素、替加環(huán)素等耐藥率仍較低，可作為臨床治療備選藥物。
　　2.本地鮑曼不動桿菌檢測出β-內(nèi)酰胺類藥物水解酶主要包括：超廣譜β-內(nèi)酰胺酶blaTEM、金屬酶blaVIM和blaIMP以及碳青霉烯酶blaOXA-23。
　　3.本地鮑曼不動桿菌攜帶的blaOXA-23碳青霉烯酶基因序列上游普遍含有插入序列ISAba1，其比例為86.2%。
　　4.主動外排基因AdeB的mRNA轉(zhuǎn)錄水平與碳青霉烯類耐藥關(guān)系密切