鮑曼不動(dòng)桿菌醫(yī)院感染及耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的和意義：
　　 通過(guò)調(diào)查鄖陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附屬太和醫(yī)院臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌醫(yī)院感染及耐藥趨勢(shì)，了解多重耐藥及亞胺培南耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的流行率及耐藥性；分析多重耐藥菌株對(duì)β-內(nèi)酰胺類藥物和氨基糖苷類藥物耐藥的分子機(jī)制；檢測(cè)Ⅰ類整合子的整合酶基因在多重耐藥菌株中的攜帶率，為指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物，減少耐藥菌株的流行及傳播奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：
　　 回顧性分析鄖陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附屬太和醫(yī)院細(xì)菌室2001年1月至2007年1

2、2月共332株非重復(fù)分離鮑曼不動(dòng)桿菌的感染分布及對(duì)13種抗菌藥物的耐藥性，分析多重耐藥及亞胺培南耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的流行率；瓊脂稀釋法檢測(cè)多重耐藥菌株對(duì)16種抗菌藥物的最低抑菌濃度（minimum inhibition concentration，MIC）；標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法檢測(cè)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases，ESBLs），改良三維試驗(yàn)法篩選產(chǎn)AmpC酶菌株，三維試驗(yàn)檢測(cè)金屬β-內(nèi)酰胺酶

3、；聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)檢測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌β-內(nèi)酰胺酶基因、氨基糖苷修飾酶基因、消毒劑與磺胺類耐藥基因qacE 1 △-sul1和Ⅰ類整合酶基因intl1。
　　 結(jié)果：
　　 2001年至2007年太和醫(yī)院共分離到非重復(fù)鮑曼不動(dòng)桿菌332 株，所有分離菌株都來(lái)源于住院病人，尤其是神經(jīng)外科，占29.8%，其次是呼吸內(nèi)科、ICU和整形外科，分別占17.4%、15.3%、12

4、.4%。這四個(gè)病房的總分離菌株占全部分離菌株的75%；感染年齡大多超過(guò)60歲，占 31.9%，其次是 30～60歲，占 49.2%；感染部位以呼吸道感染占絕大多數(shù)，達(dá) 66%，其次是各種分泌物和泌尿道感染，各占 15.7%和 6.3%。
　　 7年間，鮑曼不動(dòng)桿菌感染逐年增加，其耐藥率也越來(lái)越高。亞胺培南一直是抗菌活性最高的藥物，盡管它的耐藥率從2001年和2002年的0% 上升到2007年的 15.4%；抗菌活性僅次于亞胺培南

5、的是頭孢哌酮-舒巴坦，它的耐藥/中介率從2004年的9.8%/19.6%上升到2007年的 17.3%/28.8%；在這七年中，氨曲南的耐藥/中介率有輕微的升高（從 51.7%/34.5% 到 57.7%/30.8%）且保持較高的中介率，頭孢他啶的耐藥率在2004年最高(74.5%)，2004年前后則在 42.6%和 66.7%之間波動(dòng)；氨芐西林一直保持較高的耐藥率，且耐藥趨勢(shì)逐年升高，從69.0% 到88.5%；頭孢西丁的耐藥率平均在

6、90.8%；其他幾種藥物的耐藥率從2001年的32.5%上升到了2007年的73.1%。
　　 7年間從不同標(biāo)本中共檢測(cè)到42 株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌。多重耐藥菌株的檢出率從2001年的4.8% 上升到2007的28.6%，總檢出率為12.65%。多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多粘菌素B和多粘菌素E 全部敏感，其MIC50和MIC90 均為0.5ug/ml，全部處于敏感范圍，其他耐藥率相對(duì)較低的抗菌藥物為碳青霉烯類的亞胺培南和美羅培南，

7、其耐藥率為50.0%和52.3%，但其MIC50和MIC90 均處于耐藥范圍，含酶抑制劑類藥物頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率為35.7%，中介率為26.2%，其他12種抗菌藥物的耐藥率在78.6%～100%，且MIC50和MIC90 均已達(dá)耐藥范圍。
　　 在332 株鮑曼不動(dòng)桿菌中共有24 株對(duì)亞胺培南耐藥，總檢出率為7.23%。亞胺培南耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌同時(shí)對(duì)美羅培南耐藥，抗菌活性最高的藥物是多粘菌素B和多粘菌素E，全部敏感，MIC

8、50和MIC90 均為0.5ug/ml，其次是頭孢哌酮/舒巴坦，但其耐藥率已達(dá) 62.5%，中介率16.7%，且MIC90 高達(dá)128ug/ml，對(duì)其他13種抗菌藥物的耐藥率在 75～100%之間，MIC50和MIC90 均已達(dá)耐藥范圍。42 株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥表型共檢出5 株菌產(chǎn)ESBLs，檢出率為11.9%，36 株菌產(chǎn)生AmpC酶，檢出率為85.7%，未檢出產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶鮑曼不動(dòng)桿菌菌株。
　　 42 株多重耐

9、藥鮑曼不動(dòng)桿菌通過(guò)PCR 共檢出bla TEM 37 株,陽(yáng)性率88.1%、bla OXA-23 群24 株，陽(yáng)性率57.1%；bla ADC36 株，陽(yáng)性率85.7%，bla PER 4株，陽(yáng)性率9.5%，未檢出SHV、VEB、OXA-24、OXA-58、IMP 及 VIM型β-內(nèi)酰胺酶基因。氨基糖苷修飾酶基因的檢出情況，AAC(3)-Ia 32 株，陽(yáng)性率76.2%，AAC(6 ′)-Ib 22 株，陽(yáng)性率52.4%，ANT(3'′

10、)-I 11 株，陽(yáng)性率26.2%。42 株菌共檢出qacE 1 △-sul1基因26 株，intl1基因25 株，陽(yáng)性率分別為61.9%、59.5%。
　　 結(jié)論：
　　 1. 太和醫(yī)院2001年至2007年共分離到非重復(fù)鮑曼不動(dòng)桿菌332 株，所有分離菌株都來(lái)源于住院病人，尤其是神經(jīng)外科，占29.8%，其次是呼吸內(nèi)科、ICU和整形外科，分別占17.4%、15.3%、12.4%。這四個(gè)病房的總分離菌株占全部分離菌株的7

11、5%。感染年齡大多超過(guò)60歲，占 31.9%；呼吸道感染占絕大多數(shù)，達(dá)66%。
　　 2. 7年間，鮑曼不動(dòng)桿菌感染逐年增加，其耐藥率也越來(lái)越高?？咕钚宰罡叩乃幬锸莵啺放嗄希浯问穷^孢哌酮-舒巴坦。
　　 3. 分離出42 株多重耐藥菌株，多重耐藥菌株的檢出率從2001年的4.8% 上升到2007的28.6%，總檢出率為12.65%。多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多粘菌素B和多粘菌素E 全部敏感，其MIC50和MIC90 均為

12、0.5ug/ml，全部處于敏感范圍，其他耐藥率相對(duì)較低的抗菌藥物為碳青霉烯類的亞胺培南、美羅培南和含酶抑制劑類藥物頭孢哌酮/舒巴坦，但這三種抗菌藥物的敏感率均小于50%，且MIC50和MIC90 均處于耐藥范圍。
　　 4. 共分離出24 株亞胺培南耐藥菌株，總檢出率為7.23%，亞胺培南耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌同時(shí)對(duì)美羅培南耐藥，抗菌活性最高的藥物是多粘菌素B和多粘菌素E，其MIC50和MIC90 均為0.5ug/ml，其次是頭孢哌酮

13、/舒巴坦，但其耐藥率已達(dá) 62.5%，中介率16.7%，且MIC90 高達(dá)128ug/ml。
　　 5. 多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌攜帶bla TEM、OXA-23、ADC、PER基因，未檢出SHV、VEB、OXA-24、OXA-58、IMP 及 VIM型β-內(nèi)酰胺酶基因。氨基糖苷修飾修飾酶基因以AAC(3)-Ia和AAC(6 ′)-Ib為主。Ⅰ類整合子的整合酶基因intl1 陽(yáng)性率高達(dá)61.9%，且伴qacE 1 △-sul1基因。