頂孢霉菌株（Acremonium hansfordii）的生物學(xué)特性和對蚜蟲致病機(jī)理的研究.pdf

1、本文通過對采自甘肅榆中的頂孢霉菌株(Acremoniumhansfordii)(Ahy1)生物學(xué)特性、侵染宿主范圍、對寄主侵染力及侵染機(jī)理等方面進(jìn)行研究，獲得如下結(jié)果： 1.采自甘肅榆中桃蚜上的蟲生菌株經(jīng)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物防治省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室初步鑒定為頂孢霉Acremoniumhansfordii。并且該菌無昆蟲致病記載。 2.通過8種碳源(葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、甘露醇、肌醇、甘油、麥芽糖)和6種氮源(蛋白胨、硝酸鈉、硝

2、酸鉀、氯化銨、硝酸銨、尿素)對頂孢霉菌株(Ahy1)的生長和產(chǎn)孢量的影響研究，證實(shí)了葡萄糖、蔗糖、蛋白胨對頂孢霉菌株(Ahy1)菌落的生長和產(chǎn)孢最有利；選用的5種培養(yǎng)基(PDA、淀粉瓊脂、查彼氏、薩氏培養(yǎng)基和薩氏蛋黃培養(yǎng)基)中，薩氏培養(yǎng)基(SDAY)和薩氏蛋黃培養(yǎng)基(SEA)培養(yǎng)基最有利于菌落生長和產(chǎn)孢。 3.用“孢子浴”法將頂孢霉菌株(Ahy1)對桃蚜，苜蓿斑蚜、豆無網(wǎng)長管蚜，粘蟲，菜青蟲五種試蟲接種而進(jìn)行了生物測定。結(jié)果表明

3、對桃蚜的毒力最強(qiáng)，最終累計(jì)死亡率為84.07﹪，其次是豆無網(wǎng)長管蚜、苜蓿斑蚜和菜青蟲，其最終累計(jì)死亡率分別為83.50﹪、78.18﹪和73.3﹪，對粘蟲的毒力最差，最終累計(jì)死亡率僅為63.3﹪。蚜蟲的死亡高峰期為第4～5天，粘蟲和菜青蟲為第6～7天，所獲數(shù)據(jù)很好地?cái)M合了時(shí)間-劑量-死亡率模型。由模型參數(shù)值估計(jì)出的頂孢霉對五種試蟲的毒力指標(biāo)的半致死劑量(LD50)中桃蚜的LD50為最小，接種4～5d內(nèi)的LD50分別為131.23，49.

4、23個(gè)孢子/mm2；而粘蟲的半致死劑量較大，為¨65.33，493.49個(gè)孢子/mm2。 4.本文采用石蠟切片和掃描電鏡技術(shù)，對頂孢霉(Ahy1)侵染桃蚜過程的組織病理學(xué)進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示了頂孢霉分生孢子首先附著于桃蚜體表，在溫濕度適宜(20℃，100﹪)的條件下，20～24h后分生孢子在寄主體表萌發(fā)，形成芽管后侵入體內(nèi)，大約在36h內(nèi)基本完成。在寄主體內(nèi)菌體以酵母體的形式進(jìn)行繁殖，形成菌絲段并產(chǎn)生菌絲穿透體壁，再次產(chǎn)生孢子，

5、重新侵染其它寄主昆蟲。 5.通過對頂孢霉菌株(Ahy1)在不同培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)酶活性的研究，證明了胞外蛋白酶和幾丁質(zhì)酶的分泌規(guī)律及活力與毒力變化間的相互關(guān)系。頂孢霉菌株(Ahy1)菌株在有底物誘導(dǎo)的情況下，可以分泌產(chǎn)生胞外蛋白酶和幾丁質(zhì)酶(明膠和膠念幾丁質(zhì)培養(yǎng)平板上水解圈的平均直徑分別為4.56cm和3.37cm)。通過對酶活性測定，表明不同生長時(shí)間酶產(chǎn)量水平存在明顯差異。蛋白酶和幾丁質(zhì)酶產(chǎn)量第1天最低，分別為9.73U/mL，5.4

6、2U/mL；自第2天起產(chǎn)量持續(xù)升高，第5天達(dá)到高峰，分別為37.5U/mL和31.21U/mL；第6天蛋白酶和幾丁質(zhì)酶活性開始下降。通過對蛋白酶和幾丁質(zhì)酶產(chǎn)生水平與菌株對五種試蟲的毒力進(jìn)行相關(guān)分析，表明蛋白酶和幾丁質(zhì)酶產(chǎn)量與毒力間存在顯著的相關(guān)性。 6.以菜青蟲和粘蟲為研究對象，研究了菌株侵染寄主后血淋巴酚氧化酶活力變化情況以及與毒力的關(guān)系。結(jié)果表明，頂孢霉在相同接種劑量(270.28個(gè)孢子/mm2左右)下引起的菜青蟲和粘蟲的死