福建疣孢霉菌生物學(xué)特性與種群分化研究.pdf

1、本文對福建省14個主要雙孢蘑菇產(chǎn)區(qū)疣孢霉菌的生物學(xué)特性、分子標(biāo)記遺傳分析、對殺菌劑的敏感性及對不同雙孢蘑菇菌株菌絲和子實(shí)體的侵染性進(jìn)行測定。 疣孢霉菌的生物學(xué)特性研究包括對菌落特征、菌絲形態(tài)、孢子大小等形態(tài)學(xué)特征的觀察比較。比較不同疣孢霉菌株適宜的生活條件，包括溫度、pH和不同培養(yǎng)基(PDA和蔡氏培養(yǎng)基)對菌絲生長的影響。結(jié)果表明：供試菌株有三種菌落形態(tài)，厚垣孢子和分生孢子大小、顏色有較大差別。各菌株最適生長溫度和最適pH差別不

2、大，最適生長溫度在24-26℃之間，最適pH在5-5.5之間。有13個菌株在PDA培養(yǎng)基上生長速度比在蔡氏培養(yǎng)基上生長速度快。 DNA分子標(biāo)記由于檢測手段簡單、高效，滲透到許多領(lǐng)域，在遺傳育種研究、檢測和基因克隆、研究種間的遺傳多樣性和確定遺傳關(guān)系都有廣泛應(yīng)用。我們應(yīng)用RAPD、ISSR和SRAP標(biāo)記對16個疣孢霉菌株進(jìn)行種質(zhì)資源研究。采用ITS測序技術(shù)對疣孢霉進(jìn)行種的區(qū)分。采用這三個分子標(biāo)記分別對16個疣孢霉菌株進(jìn)行聚類分析，

3、建立聚類圖，可將16個菌株分為三個類群。對莆田地區(qū)和漳州地區(qū)進(jìn)行較大規(guī)模的采樣分析發(fā)現(xiàn)：莆田地區(qū)存在三個類群，漳州存在兩個類群。ITS測序結(jié)果表明：各菌株的ITS序列相似性達(dá)到98％，所以可判斷這16株疣孢霉菌株可能為同一個種的不同生理小種，而不是疣孢霉菌屬的不同種。 鑒于疣孢霉有不同的生理小種，本試驗(yàn)選擇了五種常用殺菌劑多菌靈、特克多、施保功、代森鋅、代森錳鋅對三類疣孢霉菌絲生長、分生孢子萌發(fā)進(jìn)行了進(jìn)行室內(nèi)毒力測定。結(jié)果表明：

4、Ⅰ類疣孢霉菌絲對施保功較敏感，其半數(shù)影響濃度(50％　effective concentration，EC50)和90％影響濃度(90％　effective　concentration，EC90)分別是0.024 mg·L-1和0.93 mg·L-1，而分生孢子對代森錳鋅較敏感，其EC50和EC90分別是24.66 mg·L-1和305.47 mg·L-1；Ⅱ類疣孢霉菌絲和分生孢子均對特克多敏感，其對菌絲生長的ECso和EC90分別是0

5、.09mg·L-1和0.36 mg·L-1，對分生孢子萌發(fā)抑制的EC50和EC90分別是0.16 mg·L-1和3.70 mg·L-1；Ⅲ類疣孢霉菌絲對特克多敏感，其EC50和EC90分別是0.096mg·L-1和0.24 mg·L-1，而分生孢子對多菌靈敏感，其EC50和EC90分別是29.27mg·L-1和49.19 mg·L-1。 本文選取29株雙孢蘑菇菌株進(jìn)行疣孢霉菌侵染雙孢蘑菇菌絲的實(shí)驗(yàn)，選取9個雙孢蘑菇菌株進(jìn)行出菇試

6、驗(yàn)，測定子實(shí)體對疣孢霉菌的抗性。結(jié)果表明：氣生型菌株0042(A.s0011)其菌絲與疣孢霉菌絲不產(chǎn)生拮抗現(xiàn)象，但是，其子實(shí)體對三個類群的疣孢霉菌均有抗性。176(A.s0003)和7601(A.s0005)子實(shí)體對Ⅰ類和Ⅱ類疣孢霉菌均產(chǎn)生抗性，產(chǎn)生正常的子實(shí)體，但對Ⅱ類疣孢霉菌無抗性。其它菌株均嚴(yán)重感病，子實(shí)體畸形，腐爛，或不產(chǎn)生子實(shí)體。雙孢蘑菇子實(shí)體對疣孢霉的抗性與雙孢蘑菇菌絲體的類型無相關(guān)性，即雙孢蘑菇菌絲體對疣孢霉菌有抗性其子實(shí)