輔酶Q10對大鼠實驗性牙周炎牙齦組織中TNF-α及Il-10表達的影響.pdf

1、目的:
　　 通過建立大鼠實驗性牙周病炎模型，探討輔酶Q10(CoenzymeQ10)對其影響及防治作用，采用免疫組化方法對牙周炎牙齦組織中炎癥性細胞因子TNF-α及IL-10進行測定，初步探討輔酶Q10對牙周炎的作用及相關(guān)機理，為臨床應(yīng)用藥物防治慢性牙周炎提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 選取200g左右清潔級Wistar大鼠24只，隨機分為3組:空白對照組（N組）、牙周炎輔酶Q10治療組（Q10組）及牙周炎

2、對照組（P組），每組8只。動物分籠飼養(yǎng)，自由攝食、水，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，N組動物不做任何處理，常規(guī)實驗室飼料喂養(yǎng)，正常飲水。對Q10組及P組通過雙側(cè)下頜第一磨牙絲線結(jié)扎+黏性高糖飲食+飲自身糞便水法復制大鼠牙周炎模型。根據(jù)牙周指標和X線片確認大鼠實驗性牙周炎模型建立成功后，Q10組大鼠每日將10％水溶性輔酶Q10按9mg/kg灌胃，P組每日同劑量生理鹽水灌胃。觀察三組大鼠整個實驗過程活動狀態(tài)、飲食、體重、糞便等情況的變化，定期（每兩日一

3、次）檢查口腔牙齦組織有無出血、腫脹、糜爛及牙周袋形成等表現(xiàn)。分別于給藥前及給藥4周、8周、12周末測量各組體重，進行牙周袋平均深度(meandepthofperiodontalpocket)，牙槽骨垂直骨吸收總量(totalattachmentloss)檢測，并行統(tǒng)計學分析。分別于給藥前及給藥4周、8周、12周末各組大鼠在指標觀測及檢測結(jié)束后，動物給予過量麻醉及頸椎脫臼法處死，分離下頜骨及下頜第一磨牙牙齦組織，常規(guī)置于40g/L多聚甲醛

4、液中固定。對牙齦組織行常規(guī)脫水，石蠟包埋，制成石蠟切片，抗原修復后行免疫組化染色，光鏡下觀察，對牙周組織炎癥性細胞因子TNF-α及IL-10進行測定。
　　 結(jié)果:
　　 1、牙周病動物模型的建立
　　 造模6周后Q10組及P組均達到牙周炎標準(PD≥0.5mm)，牙槽骨吸收，牙槽嵴頂吸收呈蟲蝕狀，牙槽骨高度降低。Q10組及P組與N組相比，全身和局部臨床表現(xiàn)均有明顯差異，體重、牙周袋平均深度及牙槽骨垂直骨吸收總量

5、均有明顯差異(P＜0.01)，即造模成功。
　　 2、一般狀態(tài)及牙周狀態(tài)的觀測
　　 整個實驗過程N組大鼠全身及口腔局部均未見明顯炎癥表現(xiàn):體重逐漸增加，神態(tài)活躍，飲食飲水正常，雙側(cè)下頜第一磨牙牙齦呈菲薄堅韌，探診不出血，無附著喪失。P組及Q10組大鼠造模2周便逐漸表現(xiàn)出倦怠少動，食欲下降，體重增長緩慢等現(xiàn)象。6周末，P組及Q10組大鼠雙側(cè)下頜第一磨牙牙齦紅腫，探診易出血，牙周袋形成。Q10組大鼠給藥后，全身及局部情況均

6、逐漸改善，飲食增加，活動逐漸活躍，雙側(cè)下頜第一磨牙牙齦的顏色、腫脹程度及探診出血量均有所改善，12周末各項指標接近N組。而P組動物全身及局部狀況進行性加重，12周末大鼠雙側(cè)下頜第一磨牙牙齦腫脹暗紅，觸之極易出血，牙周袋進一步加深。
　　 3、牙周指標檢查
　　 N組大鼠在整個實驗過程未形成牙周袋及附著喪失。給藥前及給藥后各觀測時間點P組及Q10組與N組相比，大鼠雙側(cè)下頜第一磨牙牙周袋平均深度及牙槽骨是垂直骨吸收總量均顯著

7、大于N組(P＜0.01)。給藥前P組及Q10組下頜第一磨牙牙周袋平均深度及牙槽骨垂直骨吸收總量均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。12周末Q10組的下頜第一磨牙牙周袋平均深度及牙槽骨垂直骨吸收總量都明顯小于P組(P＜0.01)，
　　 4、免疫組化檢測
　　 在12周末P組牙周組織中TNF-α表達顯著高于Q10組(P＜0.01);而P組牙周組織中IL-10表達明顯低于Q10組(P＜0.01)。
　　 結(jié)論: