貓爪草有效部位和質(zhì)量控制的研究.pdf

1、中藥有效成分群辨識(shí)技術(shù)的研究是中醫(yī)藥研究的關(guān)鍵技術(shù)之一，本論文以臨床具有顯著療效但尚未進(jìn)行系統(tǒng)研究的中藥材貓爪草為研究對(duì)象，對(duì)有效成分群的辨識(shí)方法及功效相關(guān)性進(jìn)行了探索性研究。
　　 貓爪草Radix Ranunculi Ternati系毛茛科植物小毛茛Ranunculusternatus Thunb.的塊根，性甘、辛，微溫，具有清熱解毒、消腫散結(jié)的功效，臨床研究表明，貓爪草及其制劑對(duì)肺結(jié)核、淋巴結(jié)核和多種癌癥及淋巴瘤具有顯著療

2、效?，F(xiàn)代藥理研究表明，貓爪草水提液不僅對(duì)金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌等細(xì)菌有抑制作用，對(duì)S-180腫瘤株有顯著抑制作用。
　　 論文以化合物類(lèi)別為試驗(yàn)單位，以結(jié)核桿菌藥敏試驗(yàn)和細(xì)胞毒試驗(yàn)為藥效指標(biāo)，篩選了有效部位，并應(yīng)用HPLC-MSn技術(shù)進(jìn)行了譜效相關(guān)性和化合物辨識(shí)方法的探索性研究，進(jìn)行了有效部位成分的分離和藥材質(zhì)量控制的研究。
　　 論文由文獻(xiàn)綜述和實(shí)驗(yàn)兩部分組成。
　　 第一部分文獻(xiàn)綜述
　　 通過(guò)對(duì)報(bào)

3、道文獻(xiàn)資料的研究，對(duì)貓爪草的植物來(lái)源和商品用藥、資源分布、化學(xué)成分、質(zhì)量控制、藥理活性、功效主治及臨床應(yīng)用等方面的研究進(jìn)行了較為系統(tǒng)的綜述。
　　 第二部分實(shí)驗(yàn)部分
　　 一、有效部位的研究
　　 1.論文采用樹(shù)脂分離結(jié)合溶劑萃取的方法，以化合物類(lèi)別為分離單位，提取分離了進(jìn)行藥效試驗(yàn)的物質(zhì)，并結(jié)合結(jié)核桿菌藥敏試驗(yàn)和細(xì)胞毒試驗(yàn)，進(jìn)行了有效部位篩選試驗(yàn)。
　　 2.應(yīng)用HPLC-MS技術(shù)首次對(duì)貓爪草有效部位進(jìn)

4、行了譜效相關(guān)性研究；并應(yīng)用HPLC-MS/MS技術(shù)首次對(duì)有效部位的化學(xué)成分進(jìn)行了辨識(shí)方法的探索；檢索了有效部位31個(gè)化學(xué)成分可能的化學(xué)式，并利用HPLC-MS/Ms的碎片離子的精確質(zhì)量數(shù)，推測(cè)了裂解方式，根據(jù)碎片信息，推測(cè)了19個(gè)可能的化合物，并用對(duì)照品驗(yàn)證了丁二酸、辛二酸、壬二酸、癸二酸、咖啡酸等化學(xué)成分。
　　 3.首次通過(guò)對(duì)MS/MS失去碎片信息的分析，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示有效部位中有多種有機(jī)酸存在，并可分為四類(lèi)：一為芳香酸及其糖

5、苷，二為脂肪二元酸及其糖苷，三為羥基羧酸及其糖苷，四為雜環(huán)羧酸及其糖苷，其化合物辨識(shí)及驗(yàn)證尚有待進(jìn)一步探索。
　　 4.利用C18、硅膠、葡聚糖凝膠(LH-20)等層析分離技術(shù)及制備液相等手段對(duì)有效部位進(jìn)行了分離，得化合物有：辛二酸，壬二酸、癸二酸、咖啡酸、香草酸、β-谷甾醇。其中辛二酸、壬二酸、癸二酸、咖啡酸、香草酸為本論文首次從貓爪草中分離得到。
　　 二、藥材質(zhì)量控制研究
　　 根據(jù)現(xiàn)行版《中國(guó)藥典》藥材質(zhì)

6、量標(biāo)準(zhǔn)的條款及目前該藥材的藥典標(biāo)準(zhǔn)，論文在鑒別、檢查和含量測(cè)定項(xiàng)進(jìn)行了研究，并起草了藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)修訂草案。研究?jī)?nèi)容包括以下4個(gè)方面：
　　 1.鑒別項(xiàng)，研究制定了藥材的薄層鑒別方法；同時(shí)論文首次研究了應(yīng)用傅立葉變換紅外分光光度法對(duì)貓爪草藥材進(jìn)行鑒別的方法，并探索了應(yīng)用紅外分光光度法進(jìn)行藥材鑒別的參數(shù)設(shè)置。
　　 2.檢查項(xiàng)，對(duì)10批次藥材的水分、灰分、酸不溶性灰分、重金屬和浸出物含量進(jìn)行了測(cè)定，為修訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考依

7、據(jù)。
　　 3.含量測(cè)定項(xiàng)，結(jié)合藥效試驗(yàn)，選擇了總游離酸、總黃酮為分析對(duì)象，進(jìn)行了貓瓜草中總游離酸和總黃酮含量測(cè)定方法的研究。
　　 (1)首次建立了應(yīng)用電位返滴定法，直接測(cè)定藥材中總酸含量的方法，該方法操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可信，重復(fù)性好，方法學(xué)考察結(jié)果表明：符合含量測(cè)定的要求。
　　 (2)應(yīng)用差示分光光度法的原理，以堿性供試品溶液為參比，建立了中藥材貓爪草中總黃酮含量的測(cè)定方法。方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果可信，重現(xiàn)性好，方