原發(fā)性局灶節(jié)段性腎小球硬化足細(xì)胞損傷的研究.pdf

1、目的:原發(fā)性局灶節(jié)段性腎小球硬化（FSGS）是引起腎病綜合征的常見(jiàn)病因，屬于足細(xì)胞病，本研究旨在通過(guò)檢測(cè)FSGS尿足細(xì)胞及其相關(guān)分子及腎組織podocalyxin表達(dá)水平，探討局灶節(jié)段性腎小球硬化足細(xì)胞損傷的特點(diǎn)，評(píng)價(jià)檢測(cè)尿足細(xì)胞及其相關(guān)分子在FSGS診療及隨訪中應(yīng)用價(jià)值和意義。 方法：入選原發(fā)性局灶節(jié)段硬化性腎病（FSGS）患者54例，膜性腎病(MN)23例及微小病變腎病(MCD) 12例，正常對(duì)照組20例。應(yīng)用抗人podoc

2、alyxin單克隆抗體間接免疫法和流式細(xì)胞儀法檢測(cè)尿足細(xì)胞；免疫熒光檢測(cè)腎臟組織podocalyxin的表達(dá)及分布；熒光實(shí)時(shí)定量PCR法定量尿足細(xì)胞相關(guān)分子nephrin、podocin、synaptopodin mRNA的表達(dá)水平，Western 印跡定量檢測(cè)尿Wilms Tumor 1（WT1）蛋白水平。 結(jié)果： （1）對(duì)照組尿液中均未檢測(cè)到脫落的足細(xì)胞，F(xiàn)SGS組、MN組和MCD組尿足細(xì)胞陽(yáng)性檢出率分別是63％、3

3、4.8％和33.3％，F(xiàn)SGS組尿足細(xì)胞陽(yáng)性檢出率與其余各組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。FSGS組足細(xì)胞脫落數(shù)目顯著高于MCD組、MN組和對(duì)照組。伴足細(xì)胞脫落的FSGS患者與不伴足細(xì)胞脫落的患者相比，24h尿蛋白和血清白蛋白（ALB）均有顯著差異。FSGS患者足細(xì)胞脫落數(shù)目治療后較治療前顯著下降，尿足細(xì)胞消失早于尿蛋白的消失。流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)尿足細(xì)胞與熒光顯微鏡計(jì)數(shù)有顯著的相關(guān)性。FSGS患者腎組織podocalyxin分布較對(duì)照組、MN和M

4、CD患者有明顯節(jié)段缺失。 （2）FSGS組患者尿足細(xì)胞nephrin mRNA表達(dá)水平顯著高于MCD和MN組。FSGS組尿足細(xì)胞podocin mRNA表達(dá)顯著高于MCD組，與MN組比較無(wú)顯著差異。尿足細(xì)胞synaptopodin mRNA表達(dá)各組間無(wú)顯著差異。 （3）FSGS組尿 WT1蛋白量顯著高于MCD和MN組。8例FSGS患者尿液均檢測(cè)到WT1蛋白。 結(jié)論：FSGS患者足細(xì)胞損傷嚴(yán)重且大部分患者伴足細(xì)胞脫