人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤腫瘤干細(xì)胞的分離鑒定及相關(guān)表面標(biāo)志的初步研究.pdf

1、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma,RB)是嬰幼兒最常見的眼內(nèi)惡性腫瘤,目前國際上針對RB開展了以化療為主結(jié)合局部治療的綜合療法,極大改善了患兒的生命預(yù)后,然而化療存在最大的問題就是腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移1。腫瘤化療失敗后復(fù)發(fā)的主要原因是腫瘤細(xì)胞對化療藥物產(chǎn)生耐藥性,而耐藥性的產(chǎn)生機制相當(dāng)復(fù)雜,主要包括多耐藥性蛋白的功能表達、靜息期細(xì)胞對化療不敏感以及腫瘤細(xì)胞凋亡耐受等2-4,雖然在這些方面的研取得了一定的進展,但在闡釋耐藥性機制及

2、指導(dǎo)臨床應(yīng)用上并未取得根本性突破。
　　腫瘤干細(xì)胞(Cancer stem cells,CSCs)是一類極少的具有自我更新、不定潛能性并促使腫瘤形成的細(xì)胞,對腫瘤的生長、形成及轉(zhuǎn)移起到關(guān)鍵作用5,更為重要的是這部分腫瘤起始性細(xì)胞對化療藥物的敏感性較其它非致瘤性腫瘤細(xì)胞明顯降低。目前,臨床上化療很大程度上是針對大的非致瘤性腫瘤細(xì)胞組成的腫瘤塊,而不能有效殺滅或抑制腫瘤干細(xì)胞,導(dǎo)致了化療后腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移6-8。雖然不是所有惡性腫瘤的

3、生物學(xué)特點都符合腫瘤干細(xì)胞理論,但CSCs假說為理解RB化療耐藥性提出一種更為合理的細(xì)胞水平的理論解釋。通過研究腫瘤干細(xì)胞,將有利于進一步理解RB發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移的機制,可能為減少RB化療后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移提供新的治療策略。目前在多種實體瘤中均已證實有腫瘤干細(xì)胞存在,包括乳腺癌9、腦腫瘤10,11、胰腺癌12、結(jié)腸癌13、黑色素瘤14、前列腺癌7和卵巢癌6等。然而和其他腫瘤研究相比,作為眼內(nèi)腫瘤的RB由于新鮮標(biāo)本獲取的困難性以及樣本的變異性使

4、得其腫瘤干細(xì)胞的研究相對滯后。
　　本實驗通過對人RB腫瘤細(xì)胞體外采用無血清限定培養(yǎng)基長期培養(yǎng),分離得到了以腫瘤球方式生長的細(xì)胞系,并可以在連續(xù)傳代的同時保持了其自我更新、增殖及分化能力,同時通過化療耐藥性試驗及小鼠致瘤試驗評價其對化療藥物的反應(yīng)性及異體致瘤能力。同時文章第三部分還測定了表面標(biāo)志物ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G member2,ATP結(jié)合膜轉(zhuǎn)運蛋白2)、CD133和