福建蛇足石杉內生真菌的分離鑒定與石杉堿甲的HPLC檢測.pdf

1、蛇足石杉屬蕨類植物石杉科石杉屬植物，因其活性成分石杉堿甲具有很強的抑制膽堿酯酶活性、提高學習記憶力和改善老年人記憶功能的效果，對治療重癥肌無力和早老性癡呆癥有顯著效果而成為近年來學者們研究的熱點之一。本文以福建蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb.) Trev.)為材料，進行內生真菌的分離并初步鑒定，采用高效液相色譜(HPLC)法檢測蛇足石杉莖、葉及其內生真菌中的石杉堿甲(Hup A)，結果如下： 1.石杉堿甲

2、(Hup A)的HPLC法檢測體系為：Waters C18色譜柱，150 mm×4.6 mm，5μm；流動相：甲醇：0.08 mol·L-1醋酸銨緩沖液(30：70，調pH至6.0左右)；流速1 ml·min-1；檢測波長為310 nm：柱溫30℃。經HPLC法測得蛇足石杉莖、葉中Hup A的含量分別為197.80μg/g、87.54μg/g。 2.通過對蛇足石杉莖、葉半薄切片發(fā)現(xiàn)，莖、葉組織里有真菌的吸器，說明蛇足石杉體內確實

3、有內生真菌的存在。 3.采用組織塊分離法，從蛇足石杉莖、葉中分離并通過鑒定的內生真菌有5種，依次為刺盤孢屬、絲核菌屬、鐮刀菌屬、球囊霉屬和鏈格孢屬，涉及2亞門，3綱，5目，5科，5屬。內生真菌在福建蛇足石杉的不同部位的數(shù)量、分布和種群上存在差異，葉片比莖的多。 4.通過對蛇足石杉內生真菌的溫度和光照條件研究發(fā)現(xiàn)，各種菌最適宜的生長溫度均為25℃；并且更適宜在有光照的條件下生長。 5.用氯仿提取蛇足石杉內生真菌的菌