石杉堿甲電化學檢測方法的建立與應用.pdf

1、電化學分析方法（electrochemical analysis），是利用物質的電學和電化學性質進行表征和測量的一類儀器分析方法，是由生物、醫(yī)學、物理、化學、電子技術等多種學科相互滲透形成的新的研究技術。作為現(xiàn)代儀器分析手段的重要分支之一，電化學分析技術具操作簡單、儀器價廉，而且最低分析檢出限可達10-12 mol/L甚至更低，靈敏度較高、選擇性、分析精度較高和較好的重復性等優(yōu)點，已在藥物分析方面得到了較廣泛的應用。本文的主要目的是建立

2、簡單、高效、快速、耗價低的電化學分析新方法，對石杉堿甲進行分析測定，并應用于實際樣品的檢測，為藥物有效成分的分析提供新的分析策略。論文共分為三章，主要內容如下:
　　第一章 基于石墨烯-殼聚糖復合材料的電化學傳感器的研究。
　　制備石墨烯-殼聚糖復合材料的電化學傳感器，并利用該傳感器建立電化學分析方法檢測石杉堿甲。采用循環(huán)伏安法和差示脈沖伏安法研究了石杉堿甲存在情況下的電化學行為，具體考察了測試時間、石墨烯-殼聚糖復合材料的

3、修飾量、緩沖溶液的pH等測定條件的影響，確定了以8μL的石墨烯-殼聚糖復合材料修飾電極，并且馬上以0.1 V/s的速率在0.75～1.85 V范圍內，對pH10.38的測試底液中的石杉堿甲進行測定。結果表明，隨著石杉堿甲濃度的增加，其氧化峰電流I(μA)相應增大與其濃度的對數(shù)值lgc(mol/L)在3×10-8～3×10-7 mol/L范圍內呈良好的線性關系，線性方程為y(I)=11.219x(lgC)+125.43(r=0.9971)

4、。利用建立的體系對石杉堿甲片劑進行含量測定，并與國標法進行比較，發(fā)現(xiàn)該電化學方法測定結果可信，檢測時間短且靈敏度遠高于國標法。
　　第二章 基于[Fe(CN)6]3-/[Fe(CN)6]4-氧化還原體系對制劑中石杉堿甲含量的測定。
　　通過應用石杉堿甲對[Fe(CN)6]3-/[Fe(CN)6]4-體系氧化還原作用的影響建立了電化學檢測石杉堿甲的新方法，采用循環(huán)伏安法和差示脈沖伏安法研究了石杉堿甲存在情況下[Fe(CN)6]

5、3-/[Fe(CN)6]4-體系的電化學行為，具體考察了支持電解質、緩沖溶液的pH以及掃速等測定條件，確定于三電極體系中，以0.05 V/s的速率在-0.2～0.6 V范圍，于pH7.0的0.1 mol/L KCl，10 mmol/L K3Fe(CN)6和0.1 mol/L PBS溶液中進行循環(huán)伏安掃描，并利用差示脈沖伏安法進行標準曲線的建立及含量測定。結果表明，隨著HupA濃度的增加，其氧化峰電流相應下降，并且石杉堿甲抑制的峰電流ΔI

6、p（ΔIp=I0-I，其中I0和I分別表示HupA加入前后的氧化峰電流）與其濃度在1.00×10-6～4.76×10-5 mol/L范圍內呈良好的線性關系，線性方程為y(ΔIp)=0.0562x(CHupA)+14.972，r=0.9925;在1.00×10-7～5.00×10-7 mol/L范圍內亦呈良好的線性關系，線性方程為y(ΔIp)=2.6806x(CHupA)-1.6838，r=0.9933。用建立的體系對石杉堿甲片劑進行含量

7、測定，并與國標法進行比較，發(fā)現(xiàn)該電化學方法測定結果可信，檢測時間短且靈敏度遠高于國標法。
　　第三章 基于石墨烯-殼聚糖復合材料的免疫傳感器的制備及其應用的研究。
　　制備石墨烯-殼聚糖復合材料的免疫傳感器，并利用該傳感器建立電化學分析方法檢測石杉堿甲。采用循環(huán)伏安法和差示脈沖伏安法研究了石杉堿甲存在情況下的電化學行為，具體考察了掃速、抗體修飾量、測試溫度以及探針濃度等測定條件是否對該體系反應有影響，并確定先以8μL的石墨烯

8、-殼聚糖復合材料修飾電極，再在傳感器上固定10μL的石杉堿甲單克隆抗體，并且室溫下在-0.2～0.6 V的電位范圍內，以0.1 V/s的掃速范圍內，對20 mmol/L K3Fe(CN)6的測試底液中的石杉堿甲進行測定。結果表明，石杉堿甲阻斷的峰電流ΔIp（ΔIp=I0-I，其中I0和I分別表示石杉堿甲加入前后的氧化峰電流）與其濃度的對數(shù)值在1×10-13～8×10-11 mol/L范圍內呈良好的線性關系，線性方程為y(ΔIp)=14.