丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液抗肝纖維化藥理作用的分子機(jī)制.pdf

1、研究背景和目的:
　　肝纖維化是肝臟損傷持續(xù)存在、組織發(fā)生修復(fù)時(shí)細(xì)胞外基質(zhì)合成和降解失衡而引起的病理改變，主要特點(diǎn)是以膠原為主的肝臟細(xì)胞外基質(zhì)過度沉積。病毒、乙醇、自身免疫性等病因均可引起肝細(xì)胞的壞死再生和持續(xù)的纖維增生，逐漸發(fā)展為肝硬化，誘發(fā)肝功能衰竭和肝癌。阻斷肝纖維化的發(fā)生和發(fā)展，對(duì)防治肝硬化具有重要意義。丹參酮ⅡA磺酸鈉，為中藥丹參中分離的二萜醌類化合物丹參酮ⅡA經(jīng)磺化而得到的水溶性物質(zhì)，具有多種藥理作用，本研究著重探索丹

2、參酮ⅡA磺酸鈉注射液抗四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的作用及其分子機(jī)制。
　　研究方法:
　　將48只SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、低劑量給藥組、高劑量給藥組，每組12只。通過50％CCl4/花生油溶液(1mL·kg-1)灌胃誘導(dǎo)建立肝纖維化模型。低劑量組在建模同時(shí)每天腹腔注射丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液5mL·kg-1，高劑量組在建模同時(shí)每天腹腔注射丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液15mL·kg-1。6周后處死，觀察大鼠肝臟大體形態(tài)，稱

3、取肝臟重量，計(jì)算肝臟重量/體重比；運(yùn)用 HE染色和Masson染色檢測(cè)肝臟組織學(xué)變化及膠原沉積的狀況；全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血清總膽紅素（TBIL）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量；放射免疫法測(cè)定血清透明質(zhì)酸（HA）、Ⅳ型膠原（CⅣ）、層粘連蛋白（LN）和Ⅲ型前膠原肽（PC-Ⅲ）；Western blot檢測(cè)肝臟組織中NF-κB和IκBα蛋白的表達(dá)。
　　研究結(jié)果:
　　1.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給

4、藥組和高劑量給藥組的大鼠體重下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠體重高于模型組和低劑量組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠肝臟重量增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠肝臟重量低于模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠肝臟指數(shù)升高，差異具有統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠肝臟指數(shù)低于模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠血清TBIL的水平升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠血清TBIL的水平低于模型組和低劑量給藥組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　5.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠血清ALT的水平升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

6、＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠血清ALT的水平低于模型組和低劑量給藥組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　6.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠血清AST的水平升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），；高劑量給藥組的大鼠血清AST的水平低于模型組和低劑量給藥組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　7.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠血清HA的含量升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、意義（P＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠血清HA的含量低于模型組和低劑量給藥組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　8.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠血清LN的含量升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠血清LN的含量低于模型組和低劑量給藥組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　9.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠血清CⅣ的含量升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義（P＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠血清CⅣ的含量低于模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　10.與對(duì)照組相比，模型組、低劑量給藥組和高劑量給藥組的大鼠血清PC-Ⅲ的含量升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高劑量給藥組的大鼠血清PC-Ⅲ的含量低于模型組和低劑量給藥組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　11.根據(jù)《病毒性肝炎防治方案》進(jìn)行肝纖維化分級(jí)。結(jié)果顯示，對(duì)照組肝組織結(jié)構(gòu)正常，與模型組相比，

9、高劑量給藥組纖維化程度有明顯改善（P＜0.05）。
　　12. Western blot檢測(cè)肝臟組織中NF-κB、IкBα蛋白表達(dá)。結(jié)果顯示，與模型組相比，低劑量給藥組和高劑量給藥組細(xì)胞核中NF-кB的表達(dá)降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與模型組相比，低劑量給藥組和高劑量給藥組細(xì)胞質(zhì)中NF-кB和IкBα的表達(dá)呈劑量依賴性增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　研究結(jié)論:
　　本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，大鼠