丹參酮ⅡA磺酸鈉對(duì)大鼠離體肺動(dòng)脈的作用及機(jī)制.pdf

1、背景：
　　丹參為唇形科植物，其干燥根及根莖為常用大宗中藥材，已廣泛應(yīng)用于治療各種心血管疾病。目前已在丹參中鑒定出至少50種水溶性和30種脂溶性化合物，這些活性成分具有改善微循環(huán)、舒張冠狀動(dòng)脈、改善心肌缺血、抗氧化、抗炎、抗凋亡等多種藥理作用。在丹參的眾多提取物中，丹參酮ⅡA（TanⅡA）是含量最豐富、最具代表性的脂溶性雙萜類(lèi)化合物，其經(jīng)磺化而形成的水溶性衍生物——丹參酮ⅡA磺酸鈉（STS），已成為我國(guó)心血管領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的一線(xiàn)現(xiàn)代

2、中藥。有研究報(bào)道，TanⅡA和其他丹參活性提取物對(duì)不同種屬動(dòng)物的股動(dòng)脈、腸系膜動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈、腎動(dòng)脈、主動(dòng)脈等具有血管舒張作用，其機(jī)制包括抑制血管平滑肌細(xì)胞鈣離子內(nèi)流、激活血管平滑肌細(xì)胞膜上的鉀離子通道、通過(guò)感覺(jué)神經(jīng)釋放降鈣素基因相關(guān)肽，以及通過(guò)一氧化氮和細(xì)胞色素P450代謝產(chǎn)物間接促進(jìn)血管舒張。然而，TanⅡA對(duì)肺動(dòng)脈的作用和機(jī)制仍不清楚。
　　低氧性肺動(dòng)脈高壓（HPH）是一種以持續(xù)性肺血管收縮和肺血管結(jié)構(gòu)重構(gòu)為特征的嚴(yán)重綜合征

3、和并發(fā)癥，目前臨床上仍缺乏理想的治療措施。我們前期的研究發(fā)現(xiàn)，STS可以降低低氧大鼠的平均肺動(dòng)脈壓，抑制遠(yuǎn)端肺血管的結(jié)構(gòu)重構(gòu)，從而起到防治HPH的作用。然而TanⅡA對(duì)急性缺氧條件下的大鼠肺動(dòng)脈以及HPH大鼠結(jié)構(gòu)重構(gòu)的肺動(dòng)脈的效應(yīng)仍未見(jiàn)報(bào)道。
　　因此，本實(shí)驗(yàn)采用離體血管灌流技術(shù)，探討STS對(duì)大鼠肺動(dòng)脈的作用及機(jī)制，并進(jìn)一步觀察STS對(duì)大鼠急性低氧性肺血管收縮和HPH大鼠結(jié)構(gòu)重構(gòu)的肺血管反應(yīng)性的影響。
　　目的：
　　

4、（1）觀察STS對(duì)常氧條件下大鼠離體肺動(dòng)脈反應(yīng)性的影響；
　?。?）觀察STS對(duì)常氧條件下大鼠離體肺動(dòng)脈反應(yīng)性的作用機(jī)制；
　?。?）觀察STS對(duì)急、慢性缺氧條件下大鼠離體肺動(dòng)脈反應(yīng)性的影響。
　　方法：
　?。?）采用大鼠離體肺動(dòng)脈灌流技術(shù)，以累積濃度法觀測(cè)常氧條件下STS對(duì)苯腎上腺素（PE，1μmol/L）或高鉀（60mmol/L）預(yù)收縮的大鼠離體肺動(dòng)脈血管環(huán)（三級(jí)，外徑<300μm）張力的影響；
　　

5、（2）分別采用機(jī)械法去除內(nèi)皮、一氧化氮合酶抑制劑左旋硝基精氨酸甲酯（L-NAME，100μmol/L）、血紅素氧合酶抑制劑鋅原卟啉Ⅸ（ZnppⅨ，10μmol/L）、環(huán)氧合酶抑制劑吲哚美辛（10μmol/L）、電壓門(mén)控鉀通道（KV）抑制劑4-氨基吡啶（4-AP，1mmol/L）、Ca2+激活鉀通道（KCa）抑制劑四乙胺（TEA，10mmol/L）、ATP敏感鉀通道（KATP）抑制劑格列苯脲（10μmol/L）、內(nèi)向整流鉀通道（KIR）抑

6、制劑氯化鋇（BaCl2，100μmol/L）、無(wú)鈣液處理血管環(huán)，探討STS影響大鼠離體肺動(dòng)脈張力的機(jī)制；
　?。?）采用持續(xù)通入95％N2+5％CO2混和氣體處理正常大鼠離體肺動(dòng)脈血管環(huán)60min，觀測(cè)STS預(yù)處理對(duì)急性缺氧條件下大鼠肺血管收縮的影響；
　?。?）采用間斷性低壓低氧法建立大鼠HPH模型，觀測(cè)STS預(yù)處理對(duì)HPH大鼠結(jié)構(gòu)重構(gòu)的肺血管反應(yīng)性的影響。
　　結(jié)果：
　?。?）常氧條件下，STS對(duì)PE（1μ

7、mol/L）或高鉀（60mmol/L）預(yù)收縮的大鼠離體肺動(dòng)脈血管環(huán)具有雙相效應(yīng)，即在低濃度（0.01～1μmol/L）時(shí)增強(qiáng)肺血管收縮，高濃度（10～300μmol/L）時(shí)舒張肺血管。STS舒張肺血管的半數(shù)有效濃度（EC50）約為100μmol/L；
　?。?）機(jī)械性去除內(nèi)皮或L-NAME（100μmol/L）預(yù)孵育可分別減弱或增強(qiáng)STS在低濃度時(shí)對(duì)肺血管的輕微促收縮作用，而不影響其在高濃度時(shí)對(duì)肺血管的舒張作用；ZnPPⅨ（10μ

8、mol/L）和吲哚美辛（10μmol/L）不影響STS對(duì)肺血管的作用；TEA（10mmol/L）可使STS對(duì)肺血管的濃度-效應(yīng)曲線(xiàn)上移，而不影響STS的最大舒張作用和其舒張肺血管的EC50，而4-AP（1mmol/L）、格列苯脲（10μmol/L）和BaCl2（100μmol/L）不影響STS對(duì)肺動(dòng)脈的效應(yīng)；STS（300μmol/L）可消除外鈣引起的肺血管收縮，并減弱無(wú)鈣液中PE誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈收縮。
　?。?）STS（100μmo

9、l/L——STS舒張肺動(dòng)脈的EC50）預(yù)處理大鼠離體肺動(dòng)脈，可消除急性缺氧引起的早期相收縮，增強(qiáng)繼發(fā)的舒張效應(yīng)，同時(shí)明顯降低Ⅱ相收縮的幅度，并且可使急性缺氧誘導(dǎo)的Ⅱ相收縮不能持續(xù)而逆轉(zhuǎn)為持續(xù)舒張效應(yīng)；
　　（4）對(duì)HPH大鼠結(jié)構(gòu)重構(gòu)的肺動(dòng)脈，STS（100μmol/L）預(yù)處理不影響PE誘導(dǎo)的早期相收縮，但可明顯減弱遲發(fā)的收縮效應(yīng)，并將其逆轉(zhuǎn)為持續(xù)舒張效應(yīng)。
　　結(jié)論：
　　常氧條件下，STS對(duì)正常大鼠離體肺動(dòng)脈具有雙相