從NF-κB信號(hào)通路研究至真方對(duì)人大腸癌細(xì)胞多藥耐藥的影響及機(jī)制.pdf

1、本研究采用“國(guó)醫(yī)大師”張鏡人教授經(jīng)驗(yàn)方--至真方對(duì)人大腸癌多藥耐藥細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，觀察至真方含藥血清對(duì)該細(xì)胞NF-κB活性的影響，并從NF-κB信號(hào)通路探討至真方逆轉(zhuǎn)人大腸癌細(xì)胞多藥耐藥的作用機(jī)制。采用CCK-8法檢測(cè)HCT-8/VCR細(xì)胞的耐藥性及篩選至真方有效作用濃度；ELISA法檢測(cè)不同濃度至真方含藥血清對(duì)HCT-8/VCR細(xì)胞NF-κB活性的影響；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)至真方含藥血清對(duì)HCT-8/VCR細(xì)胞凋亡率的影響；Western b

2、lot、Real-timePCR檢測(cè)至真方含藥血清對(duì)HCT-8/VCR細(xì)胞NF-κB/p65、IκB-α和Caspase-3基因及蛋白表達(dá)的影響。研究表明：⑴人大腸癌耐藥細(xì)胞HCT-8/VCR對(duì)VCR的耐藥指數(shù)為 73.38，該細(xì)胞系對(duì)5-FU、CDDP、EP等藥物也產(chǎn)生了交叉耐藥，耐藥指數(shù)分別為 20.52、6.61、4.40，是一個(gè)典型的多藥耐藥細(xì)胞系。⑵體積分?jǐn)?shù)大于8％時(shí)，高、中、低劑量含藥血清組對(duì)HCT-8/VCR細(xì)胞的抑制率與

3、空白血清組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01），且呈濃度遞增趨勢(shì)，高、中劑量組比較差異性不顯著（P>0.05）。⑶不同濃度至真方含藥血清作用于HCT-8/VCR細(xì)胞12h、24h后，NF-κB活性較HCT-8/VCR陰性對(duì)照組明顯降低（P<0.01），在一定范圍內(nèi)呈濃度依賴關(guān)系；16％、32％含藥血清作用HCT-8/VCR細(xì)胞12h后，NF-κB活性與BAY11-7082陽(yáng)性對(duì)照組無(wú)明顯差異（P>0.05）。⑷流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表明，至真