番茄花粉高賴氨酸基因TSB導(dǎo)入中間偃麥草及轉(zhuǎn)基因植株再生.pdf_第1頁
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1、本實(shí)驗(yàn)通過RT-PCR從番茄花粉中獲得高效特異表達(dá)的高賴氨酸基因TSB的cDNA序列，構(gòu)建其受控于單子葉植物Ubil強(qiáng)啟動(dòng)子下的高效表達(dá)質(zhì)粒pBIUB-TSB。與此同時(shí)，以禾本科牧草中間偃麥草為材料，以它的成熟種子為外植體，建立簡(jiǎn)單的植株再生體系，并將構(gòu)建好的表達(dá)載體通過基因槍和激光微束穿刺轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入到中間偃麥草愈傷組織中，通過卡那霉素篩選，得到再生植株。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： 我們建立了中間偃麥草簡(jiǎn)單的植株再生體系：(1)愈傷誘導(dǎo)

2、培養(yǎng)基：MS+2.4-D(4.5mg/L)+BA0.1mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6,5g/L，pH值5.8～6.0；(2)愈傷繼代培養(yǎng)基：MS+2.4-D 4mg/L+BA 0.1mg/L+Vc 5mg/L+蔗糖30g+瓊脂6.5g/L+肌醇100mg/LpH值5.8～6.0；(3)芽分化培養(yǎng)基：MS+BA 2mg/L+NAAlmg/L+COCl<,2> 5mg/L+ZT0.5mg/L+蔗糖30g+肌醇100mg/L+瓊脂6.5g/

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