版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、唾液腺腺樣囊性癌(salivaryadenoidcysticcarcinoma,SACC)是一種較少見的惡性腫瘤,嗜神經(jīng)侵襲被看做是它的主要特性之一,這一特性使得其在臨床手術(shù)中不易切除干凈,致使癌細胞殘留,導致了術(shù)后腫瘤的復發(fā),這給臨床治療帶來了極大的困難,因此,探尋唾液腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲的生物學標記物并對其機制進行深入研究具有重要的臨床意義。趨化因子與腫瘤的關(guān)系已經(jīng)成為人們?nèi)找嫜芯康臒狳c,但是趨化因子與唾液腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲的
2、研究報告目前還較少,尤其是趨化因子CCL5和其受體CCR5在唾液腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用,目前國內(nèi)外尚未見報告。
目的:
1、研究趨化因子受體CCR5在唾液腺腺樣囊性癌發(fā)生和發(fā)展中的可能作用及意義;2、研究分析趨化因子受體CCR5的表達水平與唾液腺腺樣囊性癌的病理分型和其引起的腫瘤性疼痛之間的相關(guān)關(guān)系;
3、研究趨化因子受體CCR5在唾液腺腺樣囊性癌細胞系SACC-83中是否為功能性受體,并研究CCL
3、5/CCR5生物軸對唾液腺腺樣囊性癌細胞SACC-83的運動性、趨化性、侵襲性和增殖效應的影響;
4、研究CCR5受體阻斷劑Maraviroc對唾液腺腺樣囊性癌細胞SACC-83的運動性、趨化性、侵襲性和增殖效應的影響。
方法:
1、利用免疫組織化學法(SP法)對32例人唾液腺腺樣囊性癌臨床標本和38例人正常唾液腺臨床標本進行趨化因子受體CCR5的免疫組織化學染色,并應用統(tǒng)計學的方法分析受體CCR5的表達水
4、平與唾液腺腺樣囊性癌的病理分型和其引起的腫瘤性疼痛之間的相關(guān)關(guān)系。
2、利用免疫組織化學的方法(SP法)對32例臨床唾液腺腺樣囊性癌標本和20例臨床正常周圍神經(jīng)組織標本分別進行受體CCR5和配體CCL5的免疫組織化學染色,觀察兩者的表達情況;
3、利用細胞免疫化學、細胞免疫熒光和流式細胞儀技術(shù)檢測人唾液腺腺樣囊性癌細胞系SACC-83是否表達CCR5受體;
4、利用MTT增殖實驗觀察CCL5/CCR5生物軸
5、對SACC-83細胞增殖效應的影響;
5、細胞水平上,利用劃痕、趨化和侵襲實驗觀察CCL5/CCR5生物軸對SACC-83細胞的運動性、趨化性和侵襲性的影響;
6、亞細胞水平上,利用流式細胞儀技術(shù)觀察CCL5/CCR5生物軸對SACC-83細胞內(nèi)鈣離子濃度變化的影響;利用激光共聚焦顯微鏡觀察CCL5/CCR5生物軸對SACC-83細胞內(nèi)肌動蛋白聚合重排的影響。
結(jié)果:
1、受體CCR5在32例腺樣
6、囊性癌標本中的陽性表達率為93.8%(30/32),在正常唾液腺組織的腺泡組織中無表達,在腺管組織中呈強陽性著色;配體CCL5在外周正常神經(jīng)組織和唾液腺腺樣囊性癌侵襲的神經(jīng)組織內(nèi)呈陽性高表達。
2、受體CCR5的表達水平與唾液腺腺樣囊性癌的病理分型不相關(guān),與其引起的臨床腫瘤性疼痛呈正相關(guān)關(guān)系。
3、細胞免疫化學、細胞免疫熒光和流式細胞術(shù)實驗證實唾液腺腺樣囊性癌細胞系SACC-83有受體CCR5的表達,說明SACC-8
7、3細胞可以用作研究CCL5/CCR5生物軸的體外細胞。
4、在MTT增殖實驗中,加入CCL5孵育48h后,可以觀察到不同濃度的趨化因子CCL5對SACC-83細胞的增殖有明顯的促進作用,當CCL5的濃度為100ng/ml時,細胞的增殖活性達最大值;而加入阻斷劑Maraviroc將受體CCR5阻斷后,細胞的增殖效應明顯受到抑制。
5、體外劃痕實驗中,相同時間內(nèi),加入趨化因子CCL5組與空白組相比較,SACC-83細胞的
8、運動性明顯增加;體外趨化和侵襲實驗中,不同濃度的趨化因子CCL5均促進了SACC-83細胞的趨化性和侵襲性,并且對趨化因子CCL5有明顯的濃度依賴性,當CCL5的濃度為20ng/ml時,穿越聚碳酸酯膜的細胞數(shù)達最大值。而受體阻斷劑Maraviroc將受體CCR5阻斷后,穿越聚碳酸酯膜的細胞數(shù)明顯減少。
6、流式細胞儀跟蹤觀察,加入趨化因子CCL5后,SACC-83細胞內(nèi)的鈣離子濃度有一個瞬時的增高,而用受體CCR5阻斷劑Mar
9、aviroc阻斷CCR5后,即使加入趨化因子CCL5,細胞內(nèi)的鈣離子濃度也沒有明顯的變化;應用CCL5預處理SACC-83細胞后,在激光共聚焦顯微鏡下可觀察到在細胞邊緣有明顯的肌動蛋白聚合重排現(xiàn)象,并可見到細胞周圍有明顯的偽足伸出,而利用特異性的受體阻斷劑Maraviroc將受體CCR5阻斷后,以上現(xiàn)象則受到明顯抑制。
結(jié)論:
1、免疫組織化學實驗中,趨化因子受體CCR5在唾液腺腺樣囊性癌的切片標本中呈陽性表達,在正
10、常唾液腺腺泡細胞中無表達,在腺管組織中呈強陽性表達,提示CCR5可能與唾液腺腺樣囊性癌的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),并且有可能成為唾液腺腺樣囊性癌癌變的標記物之一。
2、受體CCR5的表達水平與唾液腺腺樣囊性癌的病理分型不相關(guān),與其引起的臨床腫瘤性疼痛呈正相關(guān)關(guān)系,提示CCL5/CCR5生物軸可能與唾液腺腺樣囊性癌患者的腫瘤性疼痛密切相關(guān)。
3、體外細胞實驗,首次發(fā)現(xiàn)趨化因子CCL5與其受體CCR5結(jié)合后,可以促進唾液腺腺樣
11、囊性癌細胞SACC-83的運動性、侵襲性、趨化性和增殖效應,提示兩者的結(jié)合在唾液腺腺樣囊性癌周圍神經(jīng)侵襲的過程中可能扮有重要的角色。
4、亞細胞水平實驗,發(fā)現(xiàn)CCL5/CCR5生物軸引起了SACC-83細胞內(nèi)鈣離子跨膜轉(zhuǎn)運及細胞內(nèi)肌動蛋白的聚合重排,提示CCL5與CCR5的結(jié)合為功能性結(jié)合,兩者的結(jié)合引起的細胞內(nèi)鈣離子濃度的增高及細胞內(nèi)肌動蛋白的聚合重排可能是促進SACC-83細胞侵襲性和運動趨化性的基礎(chǔ)。
5、CC
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 趨化因子受體CCR5在胃癌中的表達及其意義.pdf
- 腦源性神經(jīng)生長因子在唾液腺腺樣囊性癌神經(jīng)侵襲和轉(zhuǎn)移中作用的相關(guān)研究.pdf
- TLR4、CCL5、CCR5在尖銳濕疣皮損中的表達及意義.pdf
- CCR5及其配體CCL5在川崎病外周血T淋巴細胞中的表達研究.pdf
- 趨化因子RANTES和受體CCR5在以及移植急性和慢性排斥反應中的表達及意義.pdf
- NGF、VEGF及其受體在腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用.pdf
- 趨化因子受體CCR5及p27在食管鱗癌發(fā)生中作用的初步探討.pdf
- 趨化因子受體5(CCR5)在乳腺癌中的表達及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系.pdf
- 趨化因子受體CCR5親和短肽的篩選及活性研究.pdf
- EMMPRIN在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用及機制研究.pdf
- 中期因子在涎腺腺樣囊性癌的表達和意義以及嗜神經(jīng)侵襲動物模型的改進.pdf
- CCL5及受體CCR5,MMP-9的表達與乳腺癌臨床病理相關(guān)性研究.pdf
- CCL5在卵巢癌干細胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及其機制研究.pdf
- Id-1和TSP-1在唾液腺腺樣囊性癌中的表達及意義.pdf
- CXCL12-CXCR4在涎腺腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲中的作用.pdf
- 神經(jīng)生長因子及其受體在涎腺腺樣囊性癌中的表達以及和神經(jīng)周侵襲關(guān)系的探討.pdf
- 趨化因子受體ccr5胞外段重組蛋白的克隆、表達、純化及鑒定
- 趨化因子mcp1.mip1α.rnates及受體ccr5在腎移植術(shù)后急性排斥反應中的表達及意義
- 趨化因子受體CXCR3,CCR5,CCR3在免疫性血小板減少癥患者脾臟中的表達.pdf
- 神經(jīng)生長因子及其受體對腺樣囊性癌嗜神經(jīng)侵襲能力影響的相關(guān)研究.pdf
評論
0/150
提交評論