趨化因子RANTES和受體CCR5在以及移植急性和慢性排斥反應中的表達及意義.pdf

1、目的
　　 觀察調節(jié)激活正常T細胞表達和分泌細胞因子(regulateduponactivationnormalTexpressedandsecreted，RANTES)及其受體CCR5在大鼠同種心臟移植急性及慢性排斥反應中的表達情況，探討RANTES及CCR5與移植排斥反應之間的關系。為心臟移植術后的針對趨化因子及其受體的抗排斥反應的靶向治療提供依據。
　　 材料與方法
　　 一.實驗動物分組及模型制作

2、　　 健康近交系Wistar大鼠為供體，Sprague-Dawley大鼠為受體。采用“套管連接血管技術”建立大鼠頸部心臟移植模型，將實驗動物分為3組，A組15只SD大鼠，B組20只SD大鼠，C組25只SD大鼠。A組:急性排斥反應組，為Wistar至SD大鼠的移植，供、受體術前不作預處理，直接行心臟移植手術;B組:環(huán)孢霉素A(CyclosporineA，CsA)組，Wistar至SD大鼠的移植，供、受體術前未做任何預處理，心臟移植術后當

3、日開始腹腔內注入CsA10mg/kg，每2天1次，共8～10次;C組:供者脾細胞和環(huán)磷酰胺聯合預處理組，采用Wistar大鼠的脾細胞5～10×10(∧)7個預處理SD大鼠，第2天自SD大鼠的尾靜脈內注入環(huán)磷酰胺50～80mg/kg，第14天行頸部心臟移植術。
　　 二、病理形態(tài)學及相關因子的免疫組化測定
　　 除每組各留5只用于生存時間觀察外，分別于術后第4、7、24、56天每組各取移植心臟5例，制備成組織切片，分別用H

4、-E染色觀察移植心臟組織排斥反應病理改變程度，VanGieson染色觀察移植心臟血管病變(CAV)的血管狹窄程度，免疫組化方法檢測RANTES和CCR5在各組移植心臟組織中的表達水平。
　　 結果
　　 一、急性排斥組移植心臟存活時間為(7.3±2.3)d;CsA組移植心臟的平均存活時間為(32.6±5.4)d;供者脾細胞和環(huán)磷酰胺聯合預處理組移植心臟平均存活時間為（209.7±42.8）d。各組間移植心存活時間差異有統

5、計學意義(P＜0.05)。
　　 二、RANTES主要表達于移植心臟血管壁內膜及中膜，內皮細胞及中層平滑肌細胞周圍，心肌細胞及間質組織中，單個核侵潤細胞周圍;CCR5主要表達于移植心臟血管及移植心臟組織間質中的單個核浸潤細胞表面。
　　 三、術后各時間點移植心臟組織中均可檢測到RANTES和CCR5的表達。術后第4、7天，A組表達較強，B、C組的表達明顯弱于A組（P＜0.05）;術后第24天，A組移植心臟已喪失，B組的表

6、達明顯強于C組，并且B組的表達強于A組在第4、7天的表達(P＜0.05);術后第56天，A、B組移植心臟已喪失，C組于第56天的表達強于其于第24天的表達(P＜0.05)。
　　 結論
　　 一、移植心臟組織中RANTES及CCR5的表達水平與急性及慢性移植排斥反應的程度密切相關，并且在慢性排斥反應中的表達較急性排斥反應中更強烈。
　　 二、通過監(jiān)測RANTES和CCR5的表達水平可預測移植心臟的免疫排斥反應狀態(tài)