桑螵蛸鹽炙工藝與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、目的：桑螵蛸，《中國藥典》2005版收載的中藥，中醫(yī)臨床常用的補(bǔ)腎止遺藥，多用于小兒遺尿證和尿失禁的治療。本課題擬在桑螵蛸原有研究的基礎(chǔ)上，以團(tuán)螵蛸為研究對象，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段，對其抗利尿藥效、化學(xué)成分、鹽炙工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行全面的研究。
　　 材料與方法：
　　 材料：桑螵蛸藥材購于遼寧本溪，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)翟延君教授鑒定為螳螂科昆蟲大刀螂 Tenodera sinensis Saussure的干燥卵鞘，習(xí)稱“團(tuán)螵

2、蛸”。
　　 方法：
　　 1、通過建立大鼠水負(fù)荷尿多模型，以大鼠給藥前后0-5小時內(nèi)尿量體重比為指標(biāo)，考察生、制桑螵蛸以及桑螵蛸70％乙醇提取物的不同溶劑萃取部位的抗利尿作用，并進(jìn)行比較研究。
　　 2、通過GC-MS、TLC、HPLC法對生、制桑螵蛸的化學(xué)成分進(jìn)行對比研究，并通過硅膠柱層析、凝膠柱層析、重結(jié)晶等多種分離手段相結(jié)合，對桑螵蛸的抗利尿藥效部位進(jìn)行化學(xué)成分分離。
　　 3、以自制的酪氨酸和1

3、-（3，4二羥基苯）-2-乙酰氨基-乙酮作為指標(biāo)性成分，采用正交設(shè)計和HPLC法優(yōu)選桑螵蛸的鹽炙工藝。
　　 4、采用薄層色譜法和HPLC法，制定桑螵蛸的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1、在固定藥材來源、炮制方法、大鼠抗利尿藥理模型的基礎(chǔ)上，來研究生、制桑螵蛸的急性毒性和對水負(fù)荷大鼠尿量的影響。藥理實(shí)驗結(jié)果表明，與模型組相比在給藥15天后生、制桑螵蛸高劑量組均表現(xiàn)出抗利尿作用，其中大鼠在給藥后0-1小時和1

4、-2小時之間尿量降低明顯，0-1小時生品、蒸制品、鹽炙品的降低率分別達(dá)到了41.12％、69.76％、65.11％。桑螵蛸70％乙醇提取物的不同溶劑萃取部位抗利尿作用研究結(jié)果顯示：正丁醇萃取部位和水層對水負(fù)荷大鼠尿量有顯著影響，同模型組相比尿量降低率分別達(dá)到了69.95％、64.22％，數(shù)據(jù)分析結(jié)果表明正丁醇萃取部位及水層是桑螵蛸抗利尿的主要藥效部位。
　　 2、運(yùn)用GC-MS、TLC、HPLC法對生、制桑螵蛸的化學(xué)成分進(jìn)行對比

5、研究。圖譜對比結(jié)果表明，并未發(fā)現(xiàn)有新的成分產(chǎn)生，只是某些成分在含量上有一定的改變。從桑螵蛸的正丁醇萃取部分分離得到九個化合物，分別是:1-（3，4二羥基苯）-2-乙酰氨基-乙酮、酪氨酸、氰尿酸（tricyanic acid）、尿嘧啶（uracil）、對苯二酚（hydroquinone）、2，2'-聯(lián)苯二甲酸、胡椒酸（pileric acid）、3-氨基哌嗪-2，5-二酮（3-amihopiperazine-2，5-dione）、β-谷甾

6、醇（β-sitosterol），九個化合物均為從桑螵蛸中首次分離得到的化合物。
　　 3、以自制的酪氨酸和1-（3，4二羥基苯）-2-乙酰氨基-乙酮作為指標(biāo)性成分來考察桑螵蛸的鹽炙工藝，選擇加鹽量、悶潤時間、炒制溫度、炒制時間4個因素，用L9（34）正交設(shè)計表，采用方差分析的方法，對桑螵蛸進(jìn)行鹽炙工藝優(yōu)選。結(jié)果表明炒制時間對桑螵蛸中酪氨酸和1-（3，4二羥基苯）-2-乙酰氨基-乙酮含量影響顯著，優(yōu)選出桑螵蛸的最佳鹽炙工藝為：每1

7、00kg桑螵蛸，加鹽量2.5kg，加水30L，悶潤1 h，在100℃下炒10min。
　　 4、以自制酪氨酸和1-（3，4二羥基苯）-2-乙酰氨基-乙酮為指標(biāo)性成分，對桑螵蛸的質(zhì)量進(jìn)行綜合考察。通過對十五個不同地區(qū)收集到的桑螵蛸的水分、總灰分及酸不溶性灰分的測定、浸出物的測定等，初步制定了桑螵蛸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)論：
　　 1、桑螵蛸鹽炙品與生品相比，具有顯著的抗利尿藥效作用，連續(xù)給藥15天侯，0-1小時尿量

8、降低率達(dá)了69.76％。
　　 2、桑螵蛸的主要藥效部位為70％乙醇提取物的正丁醇層及水層。
　　 3、鹽炙桑螵蛸的最佳工藝為：每100kg桑螵蛸，加鹽量2.5kg，加水30L，悶潤1 h，在100℃下炒10min。
　　 4、根據(jù)實(shí)驗研究的結(jié)果綜合分析，暫定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如下：桑螵蛸水分不得超過13％，灰分不得超過10％，酸不溶性灰分不得超過1％，水浸出物不得低于9％，乙醇浸出物不得低于11％，指標(biāo)性成分酪氨酸含量