水蛭素對阿霉素腎硬化大鼠Ⅲ、Ⅳ型膠原的實驗研究.pdf

1、目的:
　　通過重復(fù)尾靜脈注射阿霉素建立阿霉素腎硬化大鼠模型，觀察水蛭素(Leech)對模型大鼠腎臟指數(shù)(KI)、血肌酐(CR)、尿素(Bun)、白蛋白(Alb)、總蛋白(TP)、總膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)及尿蛋白的影響;腎臟組織行石蠟切片HE染色光鏡下觀察腎臟病理結(jié)構(gòu)改變;免疫組化觀測腎臟Ⅲ、Ⅳ型膠原的表達水平;從而探討水蛭素對阿霉素腎病、腎硬化大鼠腎臟病變的影響及可能機理，從而更好的指導(dǎo)臨床對腎病、腎硬化的治療。<

2、br>　　材料與方法:
　　將40只雄性wistar大鼠隨機分為對照組(A，n=4)、阿霉素腎病組(B，n=10)、阿霉素腎硬化組(C，n=8)、阿霉素腎病水蛭素治療組(D，n=10)和阿霉素腎硬化水蛭素治療組(E，n=8)。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，B、C、D、E組大鼠尾靜脈第一次注射阿霉素(4mg/kg)，A組注射等體積生理鹽水。間隔2周后即第3周僅C、E兩組行第二次尾靜脈注射阿霉素(4mg/kg)，A、B、C組注射等體積生理鹽水。模

3、型制備成功后，D、E組給予水蛭素(0.15g/kg)灌胃干預(yù)治療6周，A、B、C組給予同體積蒸餾水灌胃干預(yù)。各組均于第1、3、5、11周檢測血總蛋白(TP)，白蛋白(ALB)，尿素(BUN)，肌酐(CR)，甘油三酯(CHOL)，總膽固醇(TG)及隨機尿蛋白定性。水蛭素灌胃治療6周后處死大鼠，留取腎臟組織標本，常規(guī)石蠟包埋行HE染色，觀察腎臟病理結(jié)構(gòu)改變，評價腎小球及腎小管間質(zhì)的硬化損傷程度;免疫組化檢測腎組織切片Ⅲ型膠原、Ⅳ型膠原的表達

4、水平。通過上述指標綜合評價水蛭素治療阿霉素腎病、腎硬化大鼠的療效。
　　結(jié)果:
　　1.水蛭素對阿霉素腎病、腎硬化大鼠尿蛋白的影響:
　　除A組外，第一次尾靜脈注射后2周B組、C組、D組、E組均出現(xiàn)尿蛋白陽性（+～+++）;重復(fù)注射阿霉素后C組、E組尿蛋白明顯增加，水蛭素治療6周后，D組較B組、E組較C組尿蛋白減少。
　　2.水蛭素對阿霉素腎病、腎硬化大鼠血生化的影響:
　　除A組外，第一次尾靜脈注射后2周

5、B組、C組、D組、E組均出現(xiàn)低蛋白血癥、高脂血癥;重復(fù)注射阿霉素后C組、E組血脂升高更明顯，且出現(xiàn)尿素肌酐異常;水蛭素干預(yù)治療6周后，D組較B組、E組較C組高脂血癥減輕，血白蛋白升高，尿素、肌酐下降。
　　3.水蛭素對阿霉素腎病、腎硬化大鼠病理結(jié)構(gòu)改變的影響:
　　B組、C組腎小球硬化指數(shù)及小管間質(zhì)損傷程度輕于D組、E組，D組較B組、E組較C組腎小球硬化指數(shù)及小管間質(zhì)損傷程度較輕。
　　4.水蛭素對阿霉素腎病、腎硬化大

6、鼠Ⅲ型膠原、Ⅳ型膠原蛋白的影響:
　?、笮湍z原、Ⅳ型膠原的表達B組、C組、D組、E組較A組均明顯增加;C組、E組較B組、D組表達增加;D組較B組、E組較C組表達量減少。
　　結(jié)論:
　　1.水蛭素能減少模型大鼠的尿蛋白，血尿素、肌酐，總膽固醇、甘油三酯，升高血清總蛋白，白蛋白。
　　2.水蛭素能顯著降低腎小球和腎小管的病理損傷程度，減輕腎小球硬化指數(shù)和小管間質(zhì)病變。
　　3.水蛭素能減少腎小球及小管間質(zhì)Ⅲ、