上皮性卵巢癌組織和化療耐藥相關(guān)的基因譜篩查.pdf

1、目的:上皮性卵巢癌的發(fā)病率約占卵巢惡性腫瘤85％-90％[1]，規(guī)范化手術(shù)加以鉑類為基礎(chǔ)的化療是其目前的主要治療方法。雖然卵巢癌的5年生存率較化療藥物出現(xiàn)前有所提升，但由于化療耐藥的發(fā)生，至今仍徘徊在20％～30％之間。研究化療耐藥發(fā)生機(jī)制、預(yù)測(cè)患者的耐藥譜進(jìn)而指導(dǎo)臨床化療用藥是當(dāng)前醫(yī)學(xué)界亟需解決的難題。隨著科學(xué)研究的進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)化療耐藥與多種基因表達(dá)異常相關(guān)，這些基因通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)藥物濃度、細(xì)胞的凋亡、DNA的修復(fù)等途徑參與卵巢癌化療耐

2、藥。國(guó)內(nèi)外學(xué)者多對(duì)耐藥基因在細(xì)胞系中的表達(dá)研究較多，無(wú)明顯臨床作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)real-time PCR技術(shù)檢測(cè)上皮性卵巢癌組織中與化療耐藥相關(guān)的基因表達(dá)進(jìn)行篩查統(tǒng)計(jì)，整體上了解卵巢癌患者化療耐藥基因的表達(dá)差異，后續(xù)與患者臨床資料相結(jié)合，篩選出具有臨床意義且存在表達(dá)差異的基因，有望通過(guò)對(duì)上皮性卵巢癌患者進(jìn)行化療前耐藥基因譜的檢測(cè)以指導(dǎo)臨床用藥。
　　方法:組織標(biāo)本取自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院婦科2013年1月至2014年2月手術(shù)切除標(biāo)

3、本50例，其標(biāo)本均經(jīng)病理檢查證實(shí)。應(yīng)用real-time PCR技術(shù)檢測(cè)20例上皮性卵巢癌組織（根據(jù)FIGO分期為高、中分化10例，低分化10例;早期7例，晚期13例。其中卵巢漿液性癌4例，卵巢粘液性癌2例，卵巢透明細(xì)胞癌2例，卵巢子宮內(nèi)膜樣癌12例），10例上皮性良性卵巢腫瘤組織標(biāo)本（卵巢粘液性囊腺瘤5例，卵巢漿液性囊腺瘤2例，卵巢囊腫3例）和20例正常卵巢組織標(biāo)本中化療耐藥相關(guān)基因(MDR1、MRP1、BCRP、LRP、GSTP1、

4、BRCA1、ERCC1、hMLH1、hMSH2、bcl-2、caspase3、survivin、P53、Topo-Ⅱα、FZD-1、Smac、EZH2、XRCC1、Wnt-1、EGFR、PTEN、TUBB3、TRAG3、CRR9、XIAP和NF-κB)mRNA的表達(dá)情況。上皮性卵巢癌組為實(shí)驗(yàn)組，上皮性良性卵巢腫瘤組和正常卵巢組為對(duì)照組。
　　結(jié)果:1MRP1 mRNA表達(dá)
　　MRP1 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵

5、巢腫瘤組、正常卵巢組中的相對(duì)表達(dá)量分別為(101.92±106.60)、(16.66±9.46)、（81.31±86.31）。上皮性卵巢癌組MRP1 mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于上皮性良性卵巢腫瘤組MRP1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量（P=0.03），與正常卵巢組相比未見(jiàn)明顯差異(P=0.56)。
　　2 BCRP mRNA的表達(dá)
　　BCRP mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為(15.39

6、±30.86)、(21.14±12.22)、（83.08±67.10）。上皮性卵巢癌組BCRP mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著低于正常卵巢組BCRPmRNA的相對(duì)表達(dá)量（P=0.00），與上皮性良性腫瘤組相比未見(jiàn)明顯差異(P=0.58)。
　　3 BRCA1 mRNA的表達(dá)
　　BRCA1 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為(9.44±13.08)、(1.40±1.29)、(1.99±3.0

7、7)。上皮性卵巢癌組BRCA1 mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于正常卵巢組BRCA1mRNA的相對(duì)表達(dá)量(P=0.02)，與上皮性良性腫瘤組相比未見(jiàn)明顯差異(P=0.24)。
　　4 Topo-ⅡαmRNA的表達(dá)
　　Topo-ⅡαmRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為(89.51±117.22)、(3.88±4.93)、(3.87±7.99)。上皮性卵巢癌組Topo-ⅡαmRNA相對(duì)表達(dá)量顯

8、著高于上皮性良性卵巢腫瘤組及正常卵巢組Topo-ⅡαmRNA的相對(duì)表達(dá)量(P=0.01，P=0.01)。
　　5 bcl-2 mRNA的表達(dá)
　　bcl-2 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為(34.19±44.20)、(12.45±6.72)、（93.38±94.57）。上皮性卵巢癌組bcl-2 mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著低于正常卵巢組bcl-2mRNA的相對(duì)表達(dá)量(P=0.02)，與

9、上皮性良性腫瘤組相比未見(jiàn)明顯差異(P=0.38)。
　　6 caspase3 mRNA的表達(dá)
　　caspase3 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為(26.08±18.10)、（3.91±2.91）、(13.33±9.38)。上皮性卵巢癌組caspase3 mRNA相對(duì)表達(dá)量與上皮性良性卵巢腫瘤組及正常卵巢組caspase3 mRNA的相對(duì)表達(dá)量相比均有顯著差異(P=0.03，P=

10、0.02)。
　　7 survivin mRNA的表達(dá)
　　survivin mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為（183.47±143.71）、（107.81±131.24）、（63.04±94.66）。上皮性卵巢癌組survivin mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于正常卵巢組survivin mRNA的相對(duì)表達(dá)量(P=0.01)，與上皮性良性腫瘤組相比未見(jiàn)明顯差異(P=0.36)。

11、>　　8 P53 mRNA的表達(dá)
　　P53 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為（135.25±142.04）、（16.10±7.68）、（107.90±106.83）。上皮性卵巢癌組P53 mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于上皮性良性卵巢腫瘤組P53 mRNA的相對(duì)表達(dá)量（P=0.01），與正常卵巢組相比未見(jiàn)明顯差異(P=0.55)。
　　9 XIAP mRNA的表達(dá)
　　XIAP

12、mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為（21.84±14.79）、（23.32±23.47）、(62.10±48.60)。上皮性卵巢癌組XIAP mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著低于正常卵巢組XIAPmRNA的相對(duì)表達(dá)量(P=0.03)，與上皮性良性腫瘤組相比未見(jiàn)明顯差異(P=0.34)。
　　10 EGFR mRNA的表達(dá)
　　EGFR mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組

13、的相對(duì)表達(dá)量分別為（3663.26±3069.61）、（3872.03±6031.59）、（13724.40±14556.37）。上皮性卵巢癌組EGFR mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著低于正常卵巢組EGFR mRNA的相對(duì)表達(dá)量（P=0.01），與上皮性良性腫瘤組相比未見(jiàn)明顯差異（P=0.95）。
　　11 EZH2 mRNA的表達(dá)
　　EZH2 mRNA在上皮性卵巢癌組、上皮性良性卵巢腫瘤組、正常卵巢組的相對(duì)表達(dá)量分別為（146.

14、91±120.40）、（8.34±8.33）、（60.08±32.35）。上皮性卵巢癌組EZH2 mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于上皮性良性卵巢腫瘤組及正常卵巢組EZH2 mRNA的相對(duì)表達(dá)量（P=0.03，P=0.01）。
　　12上皮性卵巢癌組MDR1、LRP、GSTP1、ERCC1、hMLH1、hMSH2、FZD-1、 Smac、 XRCC1、Wnt-1、PTEN、TUBB3、TRAG3、CRR9和NF-κB的mRNA相對(duì)表達(dá)量與

15、上皮性良性卵巢腫瘤組及正常卵巢組相比均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　13對(duì)MRP1、BCRP、BRCA1、bcl-2、caspase3、survivin、P53、Topo-Ⅱα、EZH2、EGFR和XIAP mRNA在上皮性卵巢癌不同病理分級(jí)及分期之間進(jìn)行比較均未見(jiàn)明顯差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:MRP1、BCRP、BRCA1、Topo-Ⅱα、bcl-2、caspase3、survivin、P53、XIAP、EGF