玉米抗大斑病種質(zhì)的抗性基因分析.pdf

1、大斑突臍孢菌(Exserohilum turcicum)引起的玉米大斑病是世界性流行病害,目前該菌己成為影響我國(guó)玉米生產(chǎn)的主要病原菌之一.利用抗病品種是防治大斑病最為經(jīng)濟(jì)、有效的措施.玉米與玉米大斑病菌問(wèn)的互作符合Flor的"基因?qū)?假說(shuō),因此可以利用基因推導(dǎo)方法對(duì)玉米資源進(jìn)行抗大斑病基因鑒定. 隨著分子標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,包括玉米大斑病抗性基因在內(nèi)的許多植物抗病基因被分子定位和作圖.利用與抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記對(duì)抗病

2、資源進(jìn)行檢測(cè)是鑒定抗病基因快速而有效的方法.本研究對(duì)100份抗大斑病玉米資源進(jìn)行了抗性基因推導(dǎo),分析了部分已發(fā)表的抗大斑病基因連鎖標(biāo)記的實(shí)用性,利用SSR和RAPD分析技術(shù)構(gòu)建了抗大斑病基因的新的連鎖標(biāo)記,并利用有效的標(biāo)記檢測(cè)了抗性種質(zhì)中可能攜帶的抗性基因.主要研究結(jié)果如下: 1. 用噴霧接種法鑒定了100份抗大斑病玉米資源,通過(guò)分析寄主與病菌小種的互作模式,確認(rèn)49份玉米資源攜帶Ht1基因,占供試資源的49﹪;24份攜帶Ht2

3、基因,占供試資源的24﹪;29份攜帶Ht3基因,占供試資源的29﹪;13份攜帶HtN基因,占供試資源的13﹪. 2. 利用含不同抗大斑病基因背景的黃早四近等基因系對(duì)已報(bào)道的與抗性基因Ht2連鎖的引物umc1202、bnlg1152、umc1149和SD一06<,633>,與抗性基因Ht3連鎖的引物bnlg1666進(jìn)行了擴(kuò)增檢測(cè).結(jié)果發(fā)現(xiàn)這5對(duì)引物在近等基因系內(nèi)均有有效擴(kuò)增,且片段大小基本一致,并未產(chǎn)生多態(tài)性擴(kuò)增或與相關(guān)抗性基因背

4、景一致的特異性的擴(kuò)增. 3. 利用4個(gè)成對(duì)近等基因系對(duì)29對(duì)SSR引物分別進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)只有位于染色體7.04區(qū)域的引物umc1684在黃早四Ht3和黃早四這對(duì)近等基因系內(nèi)的擴(kuò)增具有多態(tài)性,初步推測(cè)umc1684與Ht3連鎖. 4. 利用30條RAPD引物對(duì)黃早四近等基因系進(jìn)行了擴(kuò)增,發(fā)現(xiàn)引物S1004、S1008、S1009、S1012、S1013的擴(kuò)增產(chǎn)生特異性條帶.對(duì)這些特異條帶進(jìn)行回收、測(cè)序、引物設(shè)計(jì)、擴(kuò)增檢測(cè),