干擾不同SCMV基因片段對玉米矮花葉病抗性的影響.pdf

1、玉米矮花葉病是危害玉米生產的一種世界性病毒病害，引起該病害的病毒種類很多。SCMV(Sugarcane Mosaic Virus)是引起我國玉米矮花葉病害主要病原物，如何有效防治該病害的發(fā)生是育種工作的一項重大挑戰(zhàn)。RNA沉默機制和SCMV基因組的深入研究，為開展玉米矮花葉抗病基因工程奠定了基礎。通過對3種RNAi表達載體的轉化，探索SCMV基因組中各片段對抗性影響，能夠有效指導玉米矮花葉病抗病基因工程育種，以獲得抗性良好的種質資源。<

2、br>　　本研究在現(xiàn)有轉基因材料的基礎上，以玉米胚性愈傷為受體材料對3種RNAi(pCAMBIA3301-CNFP、pCAMBIA3301-CNSP、 pCAMBIA3301-ONFP)表達載體進行了基因槍轉化，并成功將RNAi片段導入了自交系鄭58。以前期轉化成功和繁殖的T2、T3代轉基因玉米為材料，通過PCR檢測對陽性株進行了篩選;通過對3種RNAi轉基因材料高抗株率和中抗株率的方差分析，明確了不同SCMV基因片段對抗性的影響，為R

3、NAi抗病育種提供理論支持;此外，為了準確評價病害等級，對葉片R、G、B特征進行分析，建立了一種比較準確的玉米矮花葉斑病害評價體系。主要結果如下:
　　1.利用4種自交系的胚性愈傷組織對3種RNAi表達載體進行了基因槍轉化，獲得了237棵再生苗，其中119棵正常結實，經PCR檢測，陽性株有9（鄭58轉pCAMBIA3301-CNFP2棵，鄭58轉pCAMBIA3301-CNSP7棵）棵。對轉化成功的T2、T3代24個株系1853株

4、轉基因植株進行PCR檢測，分別篩選到T2代474株、T3代615株的轉基因陽性株。PCR檢測卡方適合性檢驗結果顯示:T2代各株系基本符合孟德爾分離比，T3代不符合孟德爾分離比;其田間抗性的卡方檢驗得出了相似的結果。
　　2.T2、T3代材料的抗性接種鑒定結果顯示:大喇叭口期之后抗病性逐漸減弱，表明抗性評價應在同一時期進行。為了準確評價病害程度，對開花期形態(tài)學上端第3片葉R、G、B特征的一系列分析建立了一種比較準確的玉米矮花葉斑病害