MDR1、GST-π表達(dá)與骨及軟組織肉瘤化療耐藥相關(guān)性研究.pdf

1、目的: 檢測(cè)骨肉瘤細(xì)胞株Saos2和U20S和34例惡性骨軟組織肉瘤對(duì)7種常用化療藥物的敏感性，分析其與多藥耐藥相關(guān)基因MDR1、GST-π、LRP(肺耐藥蛋白)和MRP(多藥耐藥相關(guān)蛋白)表達(dá)的關(guān)系，探討骨與軟組織肉瘤化療耐藥的機(jī)理，為臨床上預(yù)測(cè)腫瘤耐藥程度、判斷療效和合理選擇化療方案提供依據(jù)和指導(dǎo)。 方法: 應(yīng)用MTT法測(cè)定化療藥物敏感性；應(yīng)用熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)檢測(cè)MDR1mRNA和G

2、ST-πmRNA表達(dá)水平；MDR1、GST-π、LRP和MRP蛋白水平的表達(dá)采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)進(jìn)行。 結(jié)果: 1.Saos2細(xì)胞對(duì)阿霉素(ADM)、順鉑(DDP)、5-氟脲嘧啶(5-Fu)、絲裂霉素(MMC)、氮烯咪胺(DTIC)和長(zhǎng)春新堿(VCR)的敏感性均高于U20S，耐藥相關(guān)基因的表達(dá)低于U20S，其GST-π表達(dá)僅為U20S的36.9％。兩細(xì)胞株經(jīng)1/5半數(shù)抑制濃度(IC50)的ADM和DDP分別處理24h

3、，耐藥相關(guān)基因表達(dá)上調(diào)，其中GST-π增幅達(dá)33％～43％。 2.34例原發(fā)腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性存在顯著的個(gè)體差異。患者對(duì)ADM、DDP、5-Fu、MMC、DTIC、VCR和MTX的不敏感率分別為41.18％、17.65％、47.06％、50％、76.47％、61.76％和52.94％。腫瘤組織P-gp、LRP、MRP的表達(dá)(相對(duì)熒光強(qiáng)度)分別為1.54、1.82和1.67，GST-π表達(dá)為2.11。X2分析顯示，P-gp表達(dá)

4、與ADM的耐藥呈正相關(guān)(X2=9.554，P=0.008)，GST-π表達(dá)與ADM、DDP、MMC的耐藥呈正相關(guān)(X2分別為6.051、8.015和9.704，P值分別為0.049、0.013和0.008)，MRP表達(dá)與MMC的耐藥呈正相關(guān)(X2=7.094，P=0.029)。 3.腫瘤患者耐藥基因MDR1和GST-π表達(dá)在mRNA水平和蛋白質(zhì)水平與年齡、性別、病理類型、腫瘤大小均無(wú)顯著性相關(guān)(P＞0.05)。4經(jīng)術(shù)前化療的患者

5、，組織GST-π蛋白表達(dá)水平顯著升高，且術(shù)前GST-π表達(dá)水平升高者術(shù)后復(fù)發(fā)率顯著高于水平較低者(P＜0.05)。 結(jié)論: 1.Saos2和U20S細(xì)胞株對(duì)化療藥物敏感性和4種耐藥相關(guān)基因表達(dá)均不同?；熕幬镒饔镁梢餑ST-π表達(dá)明顯上調(diào)。 2.34例原發(fā)骨軟組織肉瘤對(duì)ADM等7種化療藥物的不敏感率為17.65％～76.47％，存在顯著的個(gè)體差異并均表達(dá)MDR1等4種耐藥相關(guān)基因，其表達(dá)水平也各不相同。