棘阿米巴CB-S1株的內(nèi)共生菌實驗研究.pdf

1、目的:棘阿米巴屬Acabtgamoeba sp.的阿米巴是廣泛存在于土壤、淡水、海水、腐敗物等生活環(huán)境中的自由生活阿米巴（FLA），可引起棘阿米巴性角膜炎(AK)外在免疫功能低下的人群中可引起肉芽腫性阿米巴性腦炎(GAE)、肺部感染、皮膚病變、鼻竇炎或彌漫性感染。棘阿米巴還可做為部分致病性細菌的載體而受到學者們的廣泛關注。
　　從自然環(huán)境的土壤和水體中分離出6種棘阿米巴蟲株，其中從北京地區(qū)土壤中分離的棘阿米巴（Acanthamoe

2、b sp.）CB/S1株細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)了內(nèi)共生細菌。本學位論文，通過形態(tài)觀察和基因測序，分析和鑒定Acanthamoeb sp. CB/S1株細胞的內(nèi)共生菌。
　　方法:從北京地區(qū)土壤中分離的Acanthamoeb sp.CB/S1株PYG培養(yǎng)，用地衣紅－卡紅染色對共生菌進行形態(tài)染色觀察；用常規(guī)氯仿-酚提取基因組DNA，測序內(nèi)共生菌的16S rDNA基因序列。利用GenBank的BLAST功能進行菌種鑒定，分子生物學軟件Clustal

3、X構建進化樹。
　　結果:地衣紅－卡紅染色，Acanthamoeb sp.CB/S1株內(nèi)共生細菌呈黑色、棒狀，在胞質(zhì)內(nèi)不規(guī)則地分布。CB/S1的共生菌的16S rDNA基因序列長度為1534bp。利用GenBank的BLAST結果，CB/S1的共生菌的16Sr NA基因序列與因庫中的Candidatus Amoepophilus asiaticus5a2細菌具有98％的同源性；同時與Acanthamoeba sp. KA/E21的